[實用新型]雙色熒光雙重檢測的微流控芯片

有效

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• 申請日: 2020-06-17
• 公開（公告）號: CN212404104U
• 公開（公告）日: 2021-01-26
• 發(fā)明（設計）人: 韓琳;高亞坤;張宇
• 申請（專利權）人: 山東大學
• 主分類號: C12M1/34
• 分類號: C12M1/34;B01L3/00
• 代理公司: 青島華慧澤專利代理事務所(普通合伙) 37247
• 代理人: 馬千會

本實用新型屬于核酸檢測技術領域，具體涉及用于核酸檢測的微流控芯片。雙色熒光雙重檢測的微流控芯片，包括蓋片和基片，所述的蓋片為雙層結構，包括閥門控制層和微流道層；所述閥門控制層用于控制所述微流道層流道內(nèi)液體走向；所述微流道層包括多個檢測單元，每個檢測單元包括兩條微流道；所述微流道的一端設有進樣孔，另一端設有微腔和出樣孔；所述基片中，與微流道對應的位置修飾有納米級氧化石墨烯或石墨烯材料，與微腔對應的位置修飾有戊二醛。本實用新型的芯片，配合不同的熒光標記技術，在微流道區(qū)域測量熒光信號變化，以及在微腔區(qū)測量熒光信號變化，達到雙重檢測，互相印證的效果，從而達到miRNAs的快速、靈敏，準確的雙色雙重檢測。

技術領域

本實用新型屬于核酸檢測技術領域，具體涉及用于核酸檢測的微流控芯片。

背景技術

癌癥是全球死亡的主要原因之一，并給患者帶來極大的痛苦。傳統(tǒng)的檢測手段多是采用計算機斷層掃描（CT），核磁共振、放射性檢測、病理檢測和血液檢查等，這些方法大多使用的儀器龐大，操作繁瑣，費時費力，靈敏度低，特異性差。此外，在大多數(shù)情況下，傳統(tǒng)的檢測技術僅可以檢測到較大的腫瘤，往往在確診時，患者已經(jīng)是癌癥的中期或晚期，無法進行早期診斷，貽誤治療時機。

為了實現(xiàn)腫瘤的早診斷、早治療，更多的研究人員專注于檢測腫瘤標志物，腫瘤標志物(Tumor Marker)是反映腫瘤存在的化學類物質(zhì)。它們或不存在于正常成人組織而僅見于胚胎組織，或在腫瘤組織中的含量大大超過在正常組織里的含量，它們的存在或量變可以提示腫瘤的性質(zhì)，借以了解腫瘤的組織發(fā)生、細胞分化、細胞功能，以幫助腫瘤的診斷、分類、預后判斷以及治療指導。腫瘤標志物檢測具有的優(yōu)勢在于：敏感性高，能早期檢測出腫瘤患者；特異性好，能準確鑒別腫瘤/非腫瘤患者；有器官特異性，方便對腫瘤的定位；血清中水平與腫瘤體積大小、臨床分期相關，用以判斷預后；半衰期短，可反映腫瘤的動態(tài)變化，監(jiān)測治療效果、復發(fā)和轉移測定方法精密度、準確性高，操作方便。

miRNA是一類本身不具備編碼蛋白質(zhì)功能的內(nèi)生性RNA，約有18-25個核苷酸長度的內(nèi)源性單鏈小分子RNA。研究表明某些miRNA的異常表達與腫瘤發(fā)生、腫瘤分期和腫瘤治療密切相關，可明確檢測血清中miRNA的存在。所有這些發(fā)現(xiàn)表明，miRNA可用作腫瘤標志物，對惡性疾病的早期診斷具有積極的臨床意義。

目前，廣泛應用的miRNA分析方法，包括實時逆轉錄聚合酶鏈反應（PCR），RNA印跡技術（Northern blotting）和miRNA微陣列技術等在一定程度上可以滿足檢測要求。然而，這些方法需要轉錄和擴增，這既費時又費力，一些方法需要昂貴的試劑盒和復雜的處理，并且檢測通量較低。因此，需要建立靈敏，快速，低成本且易于操作的miRNA檢測系統(tǒng)。

實用新型內(nèi)容

本實用新型的目的是提供一種對miRNA進行檢測的微流控芯片，能夠同時對同一份檢測樣品進行不同腫瘤標志物的雙色熒光雙重檢測，極大提高了檢測的靈敏度和精度，實現(xiàn)腫瘤標志物快速、高通量檢測，為腫瘤早期診斷提供有效的檢測手段。

為了實現(xiàn)上述目的，本實用新型采用第一種技術方案是：雙色熒光雙重檢測的微流控芯片，包括蓋片和基片，所述的蓋片為雙層結構，包括閥門控制層和微流道層；所述閥門控制層用于控制所述微流道層液體流道的開啟和閉合；所述微流道層包括多個檢測單元，每個檢測單元包括兩條微流道；所述微流道的一端設有進樣孔，另一端設有微腔和出樣孔；所述的基片上，與所述微流道對應的位置修飾有納米級氧化石墨烯或石墨烯材料，與所述微腔對應的位置修飾有戊二醛。

作為本實用新型的一種優(yōu)選方式，所述的進樣孔包括探針進樣孔和樣品進樣孔，所述兩條微流道分別與兩個不同的探針進樣孔連接，與同一個樣品進樣孔連接。

作為本實用新型的一種優(yōu)選方式，兩條微流道分別與兩個不同的微腔連接，所述兩個微腔之間不連通。

作為本實用新型的一種優(yōu)選方式，兩條微流道與同一個微腔連接。