[發明專利]一種保持人牙髓干細胞干性的細胞微圖案方法

在審

• 申請號: 202011643721.6
• 申請日: 2020-12-31
• 公開（公告）號: CN112592893A
• 公開（公告）日: 2021-04-02
• 發明（設計）人: 鄭麗沙;李馳宇;郭雨薇;樊瑜波;楊智杰;宋亞欣;納靜;石秋生
• 申請（專利權）人: 北京航空航天大學
• 主分類號: C12N5/0775
• 分類號: C12N5/0775
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種保持人牙髓干細胞干性的細胞微圖案方法，包括兩種模式：(1)長寬比為1：2的矩形微圖案模式(2)長寬比為1：4的矩形微圖案模式，其特征是：

(1)每種微圖案模式的矩形微圖案不少于5000個；

(2)細胞微圖案形狀按照軸對稱和中心對稱的模式均勻排列，確保人牙髓干細胞順利按照微圖案的形狀生長，每個微圖案上有一個人牙髓干細胞貼壁生長；

(3)長寬比為1：2的矩形微圖案模式中微圖案的形狀為矩形，長45微米，寬22.5微米；

(4)長寬比為1：4的矩形微圖案模式(2)中微圖案的形狀為矩形，長64微米，寬14微米。

2.根據權利要求1所述的細胞微圖案方法，其特征是，長寬比為1：2的矩形微圖案模式(1)5000個矩形以上的微圖案形成行間距90微米，列間距45微米的微圖案陣列。

3.根據權利要求1所述的細胞微圖案方法，其特征是，長寬比為1：4的矩形微圖案模式(2)5000個以上的矩形微圖案形成行間距128微米，列間距28微米的微圖案陣列。

4.根據權利要求1-3所述的細胞微圖案方法，其特征是，該方法按照細胞微圖案的標準制作，使用聚二甲基硅氧烷PDMS制作細胞微圖案印章，在厚度0.17毫米，玻璃片上制備細胞微圖案。

5.一種保持人牙髓干細胞干性的細胞微圖案方法，其特征在于以下各個步驟：

(1)將纖維粘連蛋白FN按照50微克每毫升的濃度溶解于去離子水中；

(2)將FN溶液在帶有微圖案聚二甲基硅氧烷PDMS印章上孵育，置于37℃恒溫細胞培養箱中1小時；

(3)孵育完成后將微圖案印章置于覆蓋PDMS的厚度0.17毫米的蓋玻片上，將纖維黏連蛋白從微圖案印章上轉移至蓋玻片上；

(4)配制以α-MEM培養基為基礎，包含體積百分含量為10％的胎牛血清、100U/ml的青霉素鈉和100mg/ml的鏈霉素；

(5)將人牙髓干細胞按照15000～25000個每平方厘米的密度接種在上述微圖案的蓋玻片上，添加適量的培養基得到排列成特殊形狀的細胞微圖案培養體系。