[發(fā)明專利]一種用禽類羽毛制備金屬螯合肽的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011641441.1
• 申請(qǐng)日: 2020-12-31
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN112746092B
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-01-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王俊青;趙大偉;王倫學(xué);余忠麗
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 安徽希普生物科技有限公司;新疆希普生物科技股份有限公司
• 主分類號(hào): C12P21/06
• 分類號(hào): C12P21/06;C07K1/113
• 代理公司: 廣州科沃園專利代理有限公司 44416
• 代理人: 張帥

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種用禽類羽毛制備金屬螯合肽的方法，本發(fā)明提供的方法包括：(1)羽毛的預(yù)處理：將羽毛粉碎，置于堿溶液中，加熱，并同時(shí)用微波輔助加熱過(guò)程，過(guò)濾，加去離子水混合后噴霧干燥，得到預(yù)處理后的羽毛粉；(2)分段酶解：將預(yù)處理后的羽毛粉先通過(guò)含有角蛋白酶和風(fēng)味蛋白酶的混合酶Ⅰ進(jìn)行一次酶解，再通過(guò)含有氨基肽酶和中性蛋白酶的混合酶Ⅱ進(jìn)行二次酶解，獲得羽毛粉的酶解產(chǎn)物；(3)金屬螯合：將羽毛粉的酶解產(chǎn)物與金屬鹽進(jìn)行反應(yīng)，最終制得金屬螯合肽。由本發(fā)明制得的金屬螯合肽經(jīng)實(shí)驗(yàn)證實(shí)具有較高的螯合率，適用范圍廣，為制備金屬螯合肽提供了新的思路。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種用禽類羽毛制備金屬螯合肽的方法。

背景技術(shù)

我國(guó)蛋白資源缺乏，而常規(guī)飼料的蛋白原料包括豆粕、魚(yú)粉等，長(zhǎng)期依賴進(jìn)口，具有較大的經(jīng)濟(jì)壓力，因而迫切需要尋找質(zhì)優(yōu)價(jià)廉的新蛋白原料。羽毛是我國(guó)重要的資源之一，產(chǎn)量豐富，年產(chǎn)量可達(dá)百萬(wàn)噸級(jí)，由各種家禽羽毛為原料制成的羽毛粉蛋白含量高，羽毛中粗蛋白含量在80％以上，氨基酸含量在70％以上，氨基酸組成主要為甘氨酸、絲氨酸、胱氨酸及異亮氨酸，具有多種動(dòng)物所需要的必需氨基酸，但分子形狀與纖維相似，結(jié)構(gòu)緊密堅(jiān)實(shí)，密度大，特別是羽毛蛋白是一種高度交聯(lián)的二硫鍵構(gòu)成的角蛋白，不容易被胃蛋白酶，胰蛋白酶等一般蛋白酶降解，其本身難以被動(dòng)物消化吸收，需進(jìn)行特殊加工處理，變?yōu)榭捎糜谙盏牡鞍踪|(zhì)。

金屬螯合肽可以通過(guò)蛋白肽和可溶性的鹽螯合而成，具有生物利用率高、能維持生物體內(nèi)的酸堿平衡、增強(qiáng)免疫力和減少抗?fàn)I養(yǎng)因子等優(yōu)點(diǎn)，是近年來(lái)在生物技術(shù)領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)，但受限于一種有效獲得蛋白原料的方法，通過(guò)從商業(yè)渠道直接購(gòu)買或通過(guò)購(gòu)買純化的蛋白質(zhì)來(lái)水解獲得，其高昂的價(jià)格不利于金屬螯合肽的大范圍的使用，而家禽羽毛來(lái)源廣泛，蛋白含量高且未能有效利用，有待于尋求一種可以從家禽羽毛中獲得蛋白肽并與金屬鹽螯合的方法。

中國(guó)專利申請(qǐng)CN201210272913.X公開(kāi)了一種小肽螯合鋅復(fù)合物的制備方法與應(yīng)用，包括加入蛋白酶震蕩培養(yǎng)，酶解后加入水溶性鋅鹽螯合制得，但該方法僅適用于豆粕、玉米蛋白、馬鈴薯蛋白等植源性蛋白，而本發(fā)明是要從從家禽羽毛中獲得蛋白肽，相較于植源性蛋白，家禽羽毛其特殊的分子形態(tài)不易被酶解，需要特殊的加工方法。

中國(guó)專利申請(qǐng)CN201710732795.9公開(kāi)了一種魚(yú)蛋白小肽螯合鋅，包括脫脂、酶解、螯合的過(guò)程，提供了一種以魚(yú)肉為原材料制備金屬螯合肽的方法，但原材料價(jià)格仍然較高，未能廣泛應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明旨在提供一種制備具有高螯合率的金屬螯合肽的方法，特別是該方法結(jié)合禽類羽毛的預(yù)處理和二次酶解有效增強(qiáng)了所得酶解產(chǎn)物中小肽的含量，本發(fā)明整體步驟簡(jiǎn)單、所用原料易于獲得，為制得金屬螯合肽提供了新思路。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案是：

一種用禽類羽毛制備金屬螯合肽的方法，包括以下步驟：

S1:羽毛的預(yù)處理：將羽毛粉碎，置于pH為7-9的堿溶液中，加熱，并同時(shí)用微波輔助加熱過(guò)程，過(guò)濾，加去離子水混合后噴霧干燥，得到預(yù)處理后的羽毛粉；

S2:分段酶解：

1)將預(yù)處理后的羽毛粉置于去離子水中，得到羽毛粉的混懸液，加入混合酶Ⅰ進(jìn)行酶解，加入混合酶Ⅰ的量為羽毛粉質(zhì)量的0.3-0.7％，得到一次酶解液；

2)在一次酶解液中再加入混合酶Ⅱ進(jìn)行酶解，加入混合酶Ⅱ的量為羽毛粉質(zhì)量的0.2-0.5％，得到二次酶解液；

3)將二次酶解液煮沸滅酶、離心、過(guò)濾殘?jiān)瑢⒚附庖汉娓桑玫接鹈鄣拿附猱a(chǎn)物；

S3：金屬螯合：

將所得羽毛粉的酶解產(chǎn)物加入到去離子水中，再加入金屬鹽，在pH為8,溫度為65℃的條件下攪拌，離心、濃縮、干燥，制得金屬螯合肽。