[發明專利]葡萄糖酸鈣有關物質的高效液相色譜分析方法

有效

• 申請號: 202011633722.2
• 申請日: 2020-12-31
• 公開（公告）號: CN112611821B
• 公開（公告）日: 2022-09-13
• 發明（設計）人: 王東岳;劉印;楊學謙;宋文姬;吳寧;任繼波;高光超;陳明強
• 申請（專利權）人: 山東齊都藥業有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/74
• 代理公司: 青島發思特專利商標代理有限公司 37212
• 代理人: 耿霞

1.一種葡萄糖酸鈣有關物質的高效液相色譜分析方法，其特征在于：對于含有葡萄糖酸鈣有關物質混合物用高效色譜法進行成分分析的方法；

其中，所述的葡萄糖酸鈣有關物質包括：麥芽三糖酸鈣、異麥芽糖酸鈣、麥芽糖酸鈣或葡萄糖二酸鈣中的一種或多種；

所述的方法，包括以下步驟：

1）對照品溶液制備：

混合對照品溶液：分別精密稱取麥芽三糖酸鈣、異麥芽糖酸鈣、葡萄糖二酸鈣對照品適量，加水溶解并稀釋成每1mL中含麥芽三糖酸鈣、異麥芽糖酸鈣、葡萄糖二酸鈣各2.5μg的溶液，作為混合對照品溶液；

麥芽糖酸鈣對照品溶液：分別精密稱取麥芽糖酸鈣對照品適量，加水溶解并稀釋成每1mL中含2.5μg的麥芽糖酸鈣對照品溶液；

2）供試品溶液制備：

精密稱取葡萄糖酸鈣樣品適量，用水溶解并稀釋成每1mL中含有5mg的葡萄糖酸鈣溶液；

3）加標供試品溶液制備：

混合加標供試品溶液：精密稱取葡萄糖酸鈣樣品、麥芽三糖酸鈣、異麥芽糖酸鈣及葡萄糖二酸鈣對照品各適量，用水溶解并稀釋成每1mL中含葡萄糖酸鈣5mg、麥芽三糖酸鈣、異麥芽糖酸鈣、麥芽糖酸鈣、葡萄糖二酸鈣各2.5μg的溶液，作為混合加標供試品溶液；

麥芽糖酸鈣加標供試品溶液：精密稱取葡萄糖酸鈣樣品及麥芽糖酸鈣對照品各適量，用水溶解并稀釋成每1mL中含葡萄糖酸鈣5mg、麥芽糖酸鈣2.5μg的溶液，作為麥芽糖酸鈣加標供試品溶液；

4）色譜條件：

采用高效液相色譜儀進行檢測

檢測器：示差折光檢測器；

色譜柱：氫離子色譜柱，Rezex ROA-Organic Acid H+ (8%) Phenomenex 00H-0138-K0；規格為300*7.8mm；

柱溫：25-35℃；

流動相：0.45%-0.55%甲酸溶液；

流速：0.28-0.32mL/min；

進樣體積：10-100μL；

運行時間：60min；

5）測定方法：

分別精密量取所述對照品溶液、供試品溶液及加標供試品溶液，注入液相色譜儀，記錄色譜圖；并且所述方法在同一個高效液相色譜條件下分離葡萄糖酸鈣及其有關物質；

供試品溶液色譜圖中，確定所得供試品溶液中如有與已知雜質保留時間一致的色譜峰，按外標法進行計算，不得過0.05%；其中，已知雜質為葡萄糖酸鈣、麥芽三糖酸鈣、異麥芽糖酸鈣、麥芽糖酸鈣及葡萄糖二酸鈣，

含量%=

式中：A_x：供試品溶液中有關物質的峰面積；

A_R：對照品溶液中有關物質的峰面積；

C_R：對照品溶液對應的濃度，mg/mL；

C_x：供試品溶液濃度，mg/mL。

2.根據權利要求1所述的葡萄糖酸鈣有關物質的高效液相色譜分析方法，其特征在于：所述的柱溫為30℃。

3.根據權利要求1所述的葡萄糖酸鈣有關物質的高效液相色譜分析方法，其特征在于：所述的流動相為0.5%甲酸溶液。

4.根據權利要求1所述的葡萄糖酸鈣有關物質的高效液相色譜分析方法，其特征在于：所述的流速為0.3mL/min。

5.根據權利要求1所述的葡萄糖酸鈣有關物質的高效液相色譜分析方法，其特征在于：所述的進樣體積50μL。