[發明專利]一種應用相對電導率篩選辣椒抗白絹病種質材料的方法

在審

• 申請號: 202011633193.6
• 申請日: 2020-12-31
• 公開（公告）號: CN112858396A
• 公開（公告）日: 2021-05-28
• 發明（設計）人: 鄭井元;吳永紅;周書棟;馬艷青;朱春暉;文湘鈺;李雪峰
• 申請（專利權）人: 湖南省蔬菜研究所
• 主分類號: G01N27/06
• 分類號: G01N27/06;G01N27/20;G01N1/28
• 代理公司: 長沙和雅知識產權代理事務所(普通合伙) 43238
• 代理人: 林傳貴

本發明屬于作物抗病性鑒定技術領域，具體涉及一種應用相對電導率篩選辣椒抗白絹病種質材料的方法，包括以下步驟：(1)分離并純化辣椒白絹病菌，制備病原菌接種菌餅；(2)培育待鑒定辣椒苗，采用菌餅包埋法進行接種，將病原菌接種于辣椒苗莖基部；(3)接種后日常管理培養5d，取樣檢測各植株的電導率，計算相對電導率，鑒定不同辣椒材料對辣椒白絹病的抗病性，篩選抗性材料。本發明的鑒定結果擺脫了由于不同辣椒品種自身解離特性的引起的差異性，病害鑒定客觀性較強，鑒定方法操作簡便，鑒定結果準確可靠，病情判別極具客觀性，不易受環境和氣候因素影響，結果穩定性好，可操作性強，有利于加快抗病材料的篩選速度和新品種的培育進程。

技術領域

本發明屬于作物抗病性鑒定技術領域，具體涉及一種應用相對電導率篩選辣椒抗白絹病種質材料的方法。

背景技術

辣椒白絹病(Pepper Souhtern Blight)是一種辣椒常見的真菌性病害，是由齊整小核菌(Sclerotium rolfsii.sacc)侵害植株莖基部和根部引起的土傳性病害。主要為害莖基部，導致辣椒地上部葉片迅速萎蔫，葉色變黃變淡，整株枯死。該病在我國長江中下游及南方地區以及世界多地區普遍發生，高溫高濕地區發病尤為嚴重，造成辣椒產業產量大大降低。由于辣椒白絹病是土傳病害，防治難度較大，僅依靠化學農藥完全不足以解決根本問題，種植抗病品種是防治辣椒白絹病最有效的綠色、環保手段。抗病品種的培育需要利用有效的抗病性鑒定方法進行抗性材料的篩選、評價和鑒定。

目前，種植生產過程中對辣椒白絹病病害的抗病性鑒定主要采用田間鑒定，目測法調查發病率，這種方法受地理環境條件的限制，發病不均一、人為判斷主觀性較大，隨意性強，對材料篩選的幫助作用不大。而辣椒受到白絹病病原菌入侵時，細胞膜受到破壞致使細胞內的離子外滲，水分失散，外滲離子的數量可以用電導儀測定出來，電導的強度在一定程度上可以反映細胞膜的損傷程度，間接地反映出植物的抗病能力，但直接用電導百分率來評定辣椒品種的抗病性，無法排除不同辣椒品種間自身解離特性的差異性，實際運用中不準確性較大。因此，建立新的抗性材料篩選鑒定方法顯得尤為急迫。

發明內容

針對目前辣椒白絹病抗性鑒定方法限制較多，準確度不高的技術問題，本發明的目的是提供一種應用相對電導率篩選辣椒抗白絹病種質材料的方法，能夠快速、客觀、準確地對育種材料進行辣椒白絹病抗性鑒定，加快抗病材料的篩選速度和新品種的培育進程。

為了實現上述目的，本發明采用如下技術方案：

一種應用相對電導率篩選辣椒抗白絹病種質材料的方法，包括以下步驟：

(1)分離并純化辣椒白絹病菌，制備病原菌接種菌餅；

(2)培育待鑒定辣椒苗，采用菌餅包埋法進行接種，將病原菌接種于辣椒苗莖基部；

(3)接種后日常管理培養5d，取樣檢測各植株的電導率，計算相對電導率，鑒定不同辣椒材料對辣椒白絹病的抗病性，篩選抗性材料；

植株電導百分率測定具體步驟為：取辣椒苗上部定型葉片，每個樣品三份各稱取0.2g，分為對照組和處理組，剪成5mm x 5mm的小塊，立即投入10ml無離子水試管中，使葉片沉入水中，浸泡7h，期間間歇振蕩，浸泡結束后，測定水溶液電導率，然后將材料煮沸20min，冷卻置室溫后加無離子水補充至10ml，再浸泡過夜，次日再測量電導率；

相對電導率的計算公式為：

電導百分率＝葉片煮沸前外滲液的電導值/葉片煮沸后外滲液的電導值x100％；

相對電導率＝(處理組電導百分率-對照組電導百分率)/對照組電導百分率x100％。