[發明專利]飛蝗Rab5基因及其dsRNA在飛蝗防治中的應用

有效

• 申請號: 202011630624.3
• 申請日: 2020-12-31
• 公開（公告）號: CN112662690B
• 公開（公告）日: 2022-07-19
• 發明（設計）人: 王艷麗;范云鶴;李濤;史學凱;張建珍
• 申請（專利權）人: 山西大學
• 主分類號: C12N15/55
• 分類號: C12N15/55;C12N15/10;C12N15/113;C12N15/11;A01N63/60;A01P7/04
• 代理公司: 太原申立德知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 14115
• 代理人: 郭海燕

1.一種飛蝗Rab5基因，其特征在于：所述飛蝗Rab5基因全長的核苷酸序列如SEQ IDNO：1所示。

2.一種權利要求1所述的飛蝗Rab5基因的獲得方法，其特征在于：包括以下步驟：

步驟1，基于飛蝗轉錄組數據庫，采用生物信息學方法搜索飛蝗Rab5基因的序列；

步驟2，根據步驟1獲得的序列，設計并合成其上、下游引物；

步驟3，提取飛蝗3齡若蟲總RNA，采用M-MLV反轉錄酶將所提RNA反轉錄成第一鏈cDNA，獲得PCR擴增反應所需模板；

步驟4，利用步驟2的引物和步驟3的模板，通過PCR擴增反應獲得飛蝗Rab5基因。

3.根據權利要求2所述的一種飛蝗Rab5基因的獲得方法，其特征在于，所述步驟2中上、下游引物的核苷酸序列分別如SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4所示。

4.一種基于權利要求1所述的飛蝗Rab5基因合成的dsRNA，其特征在于：所述dsRNA其中一條鏈的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。

5.一種用于合成權利要求4所述的dsRNA的引物對，其特征在于，包括上游引物和下游引物，均含有T7啟動子，上游引物和下游引物的核苷酸序列分別如SEQ ID NO：5和SEQ IDNO：6所示。

6.一種權利要求4所述的dsRNA的合成方法，其特征在于，包括以下步驟：根據飛蝗Rab5基因設計用于合成dsRNA的上、下游引物，引物序列如SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6所示，以測序正確的LmRab5全長質粒作為模板，PCR擴增后，擴增產物經試劑盒純化，按照試劑盒說明書體外轉錄合成dsRNA。

7.一種權利要求4所述的dsRNA在飛蝗防治中的應用。