[發(fā)明專利]一種GAS樣基序突變的PCV2毒株及其制備方法和應(yīng)用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202011626875.4 | 申請日： | 2020-12-30 |
| 公開（公告）號： | CN112725291B | 公開（公告）日： | 2023-07-04 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 黃勇;童德文;韓聰;杜謙;朱磊 | 申請（專利權(quán)）人： | 西北農(nóng)林科技大學(xué) |
| 主分類號： | C12N7/01 | 分類號： | C12N7/01;C12N15/34;C12N5/071;C12R1/93 |
| 代理公司： | 西安通大專利代理有限責(zé)任公司 61200 | 代理人： | 范巍 |
| 地址： | 712100 陜*** | 國省代碼： | 陜西;61 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 gas 樣基序 突變 pcv2 及其 制備 方法 應(yīng)用 | ||
1.一種突變的PCV2病毒，其特征在于：該突變的PCV2病毒的突變位點(diǎn)位于PCV2病毒DNA與STAT5蛋白結(jié)合的序列區(qū)域內(nèi)；
所述與STAT5蛋白結(jié)合的序列區(qū)域?yàn)镚AS樣基序；
所述突變的PCV2病毒的DNA序列如SEQ.ID.NO.1所示。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種突變的PCV2病毒，其特征在于：所述突變的PCV2病毒不能與宿主細(xì)胞內(nèi)的STAT5蛋白結(jié)合，并導(dǎo)致PCV2病毒的復(fù)制能力減弱。
3.一種突變的PCV2病毒的感染性克隆載體，其特征在于：該載體包括與克隆載體骨架連接的突變的PCV2病毒的DNA序列，所述突變的PCV2病毒的突變位點(diǎn)位于PCV2病毒DNA與STAT5蛋白結(jié)合的序列區(qū)域內(nèi)，所述與STAT5蛋白結(jié)合的序列區(qū)域?yàn)镚AS樣基序，所述突變的PCV2病毒的DNA序列如SEQ.ID.NO.1所示。
4.一種突變的PCV2病毒的制備方法，其特征在于：包括以下步驟：
1）擴(kuò)增或人工合成突變的PCV2病毒的DNA序列，所述突變的PCV2病毒的突變位點(diǎn)位于PCV2病毒DNA與STAT5蛋白結(jié)合的序列區(qū)域內(nèi)；
2）將步驟1）得到的DNA序列環(huán)化后轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞，然后進(jìn)行培養(yǎng)和傳代，得到突變的PCV2病毒，所述與STAT5蛋白結(jié)合的序列區(qū)域?yàn)镚AS樣基序，所述突變的PCV2病毒的DNA序列如SEQ.ID.NO.1所示。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述一種突變的PCV2病毒的制備方法，其特征在于：所述步驟1）具體包括以下步驟：以野生型PCV2病毒DNA為模板，通過重疊PCR擴(kuò)增得到GAS樣基序突變的PCV2病毒DNA。
6.一種如權(quán)利要求1-2中任意一項(xiàng)所述的突變的PCV2病毒在制備PCV2病毒感染動物模型中的應(yīng)用。
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