[發明專利]一種亞硝酸鹽的檢測方法

在審

• 申請號: 202011612711.6
• 申請日: 2020-12-31
• 公開（公告）號: CN112285248A
• 公開（公告）日: 2021-01-29
• 發明（設計）人: 牟麗麗;蔣文賢;張應玲;方佳藝
• 申請（專利權）人: 南京方生和醫藥科技有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/60;G01N30/74;G01N30/86
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本發明公開了一種亞硝酸鹽的檢測方法，該檢測方法包含以下步驟：（1）配制對照品和供試品溶液；（2）檢測：所述檢測方法具體如下：色譜柱：Thermo Acclaim Trinity P1；流動相：磷酸二氫鉀緩沖液?乙腈，體積比：50~65∶35~50；流速：0.4~0.5mL/min；柱溫：25℃~35℃；檢測波長：205~215nm；（3）計算亞硝酸鹽的含量。該檢測方法可以快速、準確檢測供試品中亞硝酸鹽的含量，準確度、精密度、重現性及穩定性均良好。

技術領域

本發明涉及一種亞硝酸鹽的檢測方法，尤其涉及一種可以快速、準確檢測亞硝酸鹽含量的檢測方法。

背景技術

亞硝酸鹽是一類無機化合物的總稱，廣泛存在于人類環境中，是一種常見的含氮化合物，在酸性環境中易和酰胺等反應生成強致癌物質-亞硝胺類物質。2018年7月，EMA公告稱在纈沙坦未知雜質中，發現極微量的基因毒雜質亞硝基二甲胺（NDMA），隨后FDA公布了一系列基因毒性雜質，均為亞硝胺類雜質。而亞硝酸鹽作為亞硝胺類的前體化合物，因此，需要對其進行源頭控制。

目前，亞硝酸鹽的常用檢測方法為重氮偶合分光光度法，本法原理為在pH1.7以下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酰胺重氮化后再與鹽酸N-(2-萘)-乙二胺產生耦合反應，生產紫紅色的偶氮染料，比色定量，該方法樣品制備復雜，待測底物若有顏色會對檢測有影響，專屬性差等缺點。此外，還有報道使用離子色譜法進行亞硝酸根的檢測，但該法儀器成本較高，不利于方法的普及，無法作為亞硝酸鹽檢測的常規手段。

發明內容

發明目的：本發明旨在提供一種準確度、精密度、重現性及穩定性均良好的亞硝酸鹽的檢測方法。

技術方案：本發明的亞硝酸鹽的檢測方法包含以下步驟：

（1）配制對照品和供試品溶液；

（2）檢測：所述檢測方法具體如下，

流動相：磷酸二氫鉀緩沖液-乙腈，體積比：50~65∶35~50；流速：0.4~0.5mL/min；柱溫：25℃~35℃；檢測波長：205~215nm；

（3）計算亞硝酸鹽的含量。

進一步地，步驟（1）中對照品溶液的濃度為10~20μg/mL，供試品溶液的濃度為3~10mg/mL。

配制溶劑：取1000mL乙腈，加1000mL水，搖勻，超聲，即得。

對照品溶液的配制方法：精密量取亞硝酸標準離子溶液（100μg/mL）5~10mL，置50mL量瓶中，用溶劑稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液（10~20μg/mL）。

供試品溶液的配制方法：供試品約150~500mg，精密稱定，置于50mL量瓶中，加溶劑使溶解，再加溶劑至刻度，搖勻，作為供試品溶液（3~10mg/mL）。

進一步地，步驟（2）中檢測使用的色譜柱為多模式表面化學鍵合相色譜柱，柱長為30~250mm，色譜柱填料粒度為1.6~5μm；使用的色譜柱更具體為Thermo Acclaim TrinityP1，柱長為150mm，柱直徑為3mm，色譜柱填料粒度為3μm。

優選的色譜柱可以同步分離藥物成分及其對離子，具有獨特的三重表面化學作用，可實現反相、陽離子交換和陰離子交換功能，達到各組分迅速、有效分離。此外，無需離子對試劑也可有效保留親水離子和可離子化分析物，低柱流失。

進一步地，步驟（2）流動相中磷酸二氫鉀緩沖液的濃度為10~30mmol/L。

進一步地，步驟（2）流動相中磷酸二氫鉀與乙腈的體積比為55~65∶35~45。

進一步地，步驟（2）中檢測的對照品溶液、供試品溶液進樣量分別為10~20μL。