[發明專利]巴氏染色液及其制備方法與染色方法

在審

• 申請號: 202011606343.4
• 申請日: 2020-12-30
• 公開（公告）號: CN112781963A
• 公開（公告）日: 2021-05-11
• 發明（設計）人: 范雷
• 申請（專利權）人: 深路醫學科技(武漢)有限公司
• 主分類號: G01N1/31
• 分類號: G01N1/31
• 代理公司: 北京超凡宏宇專利代理事務所(特殊普通合伙) 11463
• 代理人: 周文波

本發明公開了一種巴氏染色液及其制備方法與染色方法，涉及細胞染色技術領域。本發明公開的巴氏染色液包括細胞核染色液和細胞漿染色液。該巴氏染色液配制方便，染色步驟簡潔，效果穩定，細胞對比度清晰，使用壽命長。

技術領域

本發明涉及細胞染色技術領域，具體而言，涉及一種巴氏染色液及其制備方法與染色方法。

背景技術

巴氏染色法是目前國際上推薦的一種應用于細胞病理學的染色方法，該染色法對細胞進行多色性染色，能顯示出鱗狀上皮細胞不同的分化成熟狀態，染色后可反映出鱗狀上皮細胞的分化成熟情況，細胞質透亮鮮麗，細胞核結構清晰，細胞核/質染色對比清晰，利于異常細胞、癌細胞及癌前病變細胞的發現與診斷，特別是在宮頸癌前篩查過程中發揮著重要作用。

巴氏染色液由細胞核染色液和細胞質染色液組成。細胞核染色液的主要成分為蘇木精，細胞核內染色質的主要成分DNA呈酸性帶負電，很容易與呈堿性帶正電的蘇木精結合而染色；細胞質染色液的主要成分為伊紅、亮綠和橘黃，能夠使胞漿內的蛋白質著色。細胞漿的染色與pH值有密切關系，當pH調到蛋白質等電點4.7-5.0時，胞漿對外不顯電性，此時酸或堿性染料不易染色。當pH調到6.7-6.8時，大于蛋白質的等電點pH值，表現酸性電離，而帶負電荷的陰離子，可被帶正電荷的染料染色，此時胞核也被染色，核和胞漿難以區分。因此必須把pH調至胞漿等電點以下，在染液中加入醋酸使胞漿帶正電荷(陽離子)，就可被帶負電荷(陰離子)的染料染色。

傳統的巴氏染色液配置過程繁瑣，且染色流程時間較長，特別是橘黃往往不能著色；此外傳統的巴氏染色液的使用壽命不長，容易收到外界環境的影響，染色結果不夠穩定，影響醫生病理閱片的準確性，從而影響臨床診斷。

鑒于此，特提出本發明。

發明內容

本發明的目的在于提供一種巴氏染色液及其制備方法與染色方法。該巴氏染色液是一種高清恒染的巴氏染色液，其配制方便，染色步驟簡潔，效果穩定，細胞對比度清晰，使用壽命長。

本發明是這樣實現的：

一方面，本發明提供一種巴氏染色液，其包括細胞核染色液和細胞漿染色液；

所述細胞核染色液包括按質量百分比計的如下組分：

蘇木精0.1％-1％、第一醇10％-20％、硫酸鋁2％-8％、碘酸鈉0.02％-0.1％以及冰乙酸0.1％-5％，余量為水；

所述細胞漿染色液包括按質量百分比計的如下組分：曙紅Y 0.1％-1％、亮綠0.01％-0.1％、橙黃G 0.1％-1％、磷鎢酸0.05％-0.5％、第二醇70％-95％以及碳酸鋰0.01％-0.1％，余量為水。

上述細胞核染色液對于硫酸鋁的濃度做了嚴格的控制，確保了蘇木素的上色速度與染色效果，又使染色液在全自動制片機上應用時無結晶體析出，不引起管道堵塞，同時不會造成原料的浪費，降低了染液的成本。

上述細胞漿染色液中，磷鎢酸和碳酸鋰是pH穩定劑，對外源性的酸堿有緩沖作用，提高染色的穩定性。胞漿染色液為復合染色液，跟傳統的染色液相比，染色步驟更為簡潔，染色層次分明，能準確顯示上皮細胞的分化狀態。

本發明提供的巴氏染色液通過上述改進，并結合對其他組分的用量控制，使得采用細胞核染色液和細胞漿染色液對細胞染色時，染色步驟簡潔，效果穩定，細胞對比度清晰，使用壽命長。

可選的，在一些實施方案中，所述第一醇選自甲醇、乙醇、異丙醇和丙三醇中的任意一種或幾種的組合；

所述第二醇選自甲醇、乙醇和異丙醇中的任意一種或幾種的組合。

可選的，在一些實施方案中，所述第一醇至少包括丙三醇，優選為乙醇和丙三醇的組合；所述第二醇為乙醇和異丙醇的組合。