[發明專利]一種測定萬古霉素的膠乳增強免疫比濁試劑盒

在審

• 申請號: 202011590133.0
• 申請日: 2020-12-29
• 公開（公告）號: CN112649598A
• 公開（公告）日: 2021-04-13
• 發明（設計）人: 劉斌虎;吳馮波
• 申請（專利權）人: 上海云澤生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/531
• 分類號: G01N33/531;G01N33/543;G01N33/68
• 代理公司: 上海邦德專利代理事務所(普通合伙) 31312
• 代理人: 王文娟

本發明提出一種測定萬古霉素的膠乳增強免疫比濁試劑盒，包括試劑R1、試劑R2和萬古霉素校準品；試劑R1包括萬古霉素檢測抗原、緩沖劑、NaCl、BSA、MgCl₂、10％NaN₃溶液、EDTA?2K和葡聚糖；試劑R2包括萬古霉素抗體、萬古霉素致敏膠乳微球、緩沖劑、NaCl、Blockmaster DB1130、10％NaN₃溶液、蔗糖、海藻糖和葡聚糖；從而提出一種具有操作簡單、快速、靈敏度高的特點，并具有良好的準確度和穩定性，可與金標準HPLC檢測值高度一致的萬古霉素檢測試劑盒。

技術領域

本發明涉及萬古霉素檢測技術領域，尤其涉及一種測定萬古霉素的膠乳增強免疫比濁試劑盒。

背景技術

萬古霉素，是一種多肽類抗生素，通常以鹽酸鹽形式存在，在溶液中能被多種重金屬鹽類沉淀。作為一種窄譜抗生素，僅對革蘭陽性菌有效，如溶血性鏈球菌、肺炎球菌及腸球菌等均屬敏感，對耐藥金葡菌尤為敏感。其作用機制是抑制細菌細胞壁的合成，它主要和細菌細胞壁結合，而使某些氨基酸不能進入細胞壁的糖肽中，一般被作為抗生素的“最后一道防線”，萬古霉素是治療耐甲氧西林金黃色葡萄球菌、耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌和腸球菌所致的重癥感染包括敗血癥、肺部感染、皮膚軟組織感染的療效確切又比較安全的抗生素。對于耐甲氧西林金黃色葡萄球菌院內肺部感染，萬古霉素為首選藥物。

萬古霉素的治療窗非常小(有效濃度與中毒濃度接近)，不良反應大，主要包括腎損害和耳毒性，因此進行藥物濃度監測十分重要。尤其是腎功能減退的患者，或同時接受其它腎毒性耳毒性抗生素治療的患者，根據血藥濃度調整治療更為關鍵。

目前檢測萬古霉素血藥濃度的方法主要有高效液相-質譜聯用(HPLC-MS)、化學發光微粒子免疫測定(CMIA)以及酶聯免疫吸附法(ELISA)等。其中HPLC-MS法測定血藥濃度準確、靈敏，但其操作繁瑣，檢測時間長，檢測成本高，需要昂貴設備，主要用于科研領域或作為一種參考方法。CMIA是目前常用的檢測方法，其檢測自動化程度高，檢測結果準確，但試劑價格昂貴，需要使用專門配套的儀器。酶聯免疫吸附法則存在檢測時間長，操作復雜，重復性差等缺點。

發明內容

本發明的目的在于提出一種操作簡單、快速、靈敏度高、可應用于自動生化分析儀的萬古霉素檢測方法及用于檢測的試劑盒。

為達到上述目的，本發明提出一種測定萬古霉素的膠乳增強免疫比濁試劑盒，包括試劑R1、試劑R2和萬古霉素校準品；

所述試劑R1包括萬古霉素檢測抗原、緩沖劑、NaCl、BSA、MgCl₂、10％NaN₃溶液、EDTA-2K和葡聚糖；

所述試劑R2包括萬古霉素抗體、萬古霉素致敏膠乳微球、緩沖劑、NaCl、Blockmaster DB1130、10％NaN₃溶液、蔗糖、海藻糖和葡聚糖。

進一步的，在所述試劑R1和R2中，所述緩沖劑為下述任一試劑與其共軛酸或共軛堿組成的緩沖對：2-(N-嗎啡啉)乙磺酸(MES)、三羥甲基氨基甲烷(Tris)、3-(N-嗎啡代)丙烷磺酸(MOPSO)、4-羥乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)；

所述試劑R1和R2的pH為5.0-9.0；所述緩沖劑的濃度優選為15-100mM。

進一步的，在試劑R1中，各組分的濃度為：400-900ug/L萬古霉素檢測抗原、5.33g/LMES一水合物、9g/LNaCl、5g/LBSA、0.5g/LMgCl₂、5mL/L 10％NaN₃溶液、5g/L EDTA-2K以及18g/L葡聚糖(450000-600000)。