[發明專利]使用干細胞治療宮腔粘連的方法

有效

• 申請號: 202011568877.2
• 申請日: 2020-12-25
• 公開（公告）號: CN112587550B
• 公開（公告）日: 2023-03-24
• 發明（設計）人: 劉冰;李容;湯樂;王正;肖海蓉;陸偉峰
• 申請（專利權）人: 博雅干細胞科技有限公司
• 主分類號: C12N5/073
• 分類號: C12N5/073;A61K35/28;A61K47/02;A61K47/18;A61P15/00;C12N5/0775
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本發明涉及使用干細胞治療宮腔粘連的方法。該方法中涉及到一種細胞制劑，其中包含羊膜間充質干細胞和藥用溶媒。所述藥用溶媒是水；該細胞制劑是供注射方式使用的制劑。所述羊膜間充質干細胞是經傳代培養至1～20代的細胞，所述羊膜間充質干細胞的濃度為(1～8)×10⁶個/ml，其中還包含氯化鈉，例如其濃度為7～10mg/ml。該細胞制劑是照包括如下步驟的方法制備得到的：將氯化鈉等藥用輔料用適量水溶解，得到鹽水溶液；將傳代培養所得間充質干細胞轉移至離心管中離心，棄上清，加鹽水溶液使細胞重懸，制得細胞制劑。本發明還涉及所述細胞制劑在制備用于治療宮腔粘連的藥物中的用途。本發明的方法、細胞制劑和制藥用途使用羊膜間充質干細胞的細胞制劑治療宮腔粘連，促進子宮內膜修復，呈現如說明書所述優異技術效果。

技術領域

本發明屬于干細胞治療技術領域，涉及從人羊膜制備羊膜間充質干細胞的方法，還涉及由該方法制備獲得的羊膜間充質干細胞，以及它們的治療用途。具體涉及的治療用途是使用干細胞治療宮腔粘連，促進子宮內膜修復的細胞制劑。尤其是涉及使用羊膜間充質干細胞配制成的制劑，將其用于治療宮腔粘連的用途。

背景技術

宮腔粘連(intrauterine adhesions，IUA)又稱Asherman綜合征，是嚴重危害女性身心健康的臨床常見疾病之一。任何形式的宮腔內手術操作，感染等均可引起的子宮內膜損傷，進而導致子宮內膜粘連和纖維化，宮腔部分或全部閉塞，表現為月經稀發、閉經、反復流產、不孕癥等一系列臨床癥候。文獻報道。我國不孕癥的發病率6～15％，其中包括著床障礙等宮腔環境因素占全部病因學的15～31％，且有上升趨勢。如何預防，逆轉，修復子宮內膜損傷，是治療宮腔粘連的關鍵因素。

現有的治療手段局限，治療效果差復發率高。臨床治療措施主要是基于粘連松解術后刺激子宮內膜再生，以及防治術后再粘連。包括雌激素療法、宮腔內球囊、可吸收防粘連物質置放、羊膜宮腔移植等等。雌激素可刺激子宮內膜再生，加速祼露區的上皮化，覆蓋子宮創面，防止新的粘連形成。因此，粘連松解術后聯合使用雌激素成為主要的治療手段，是公認的最佳治療方案。但治療后有效率不足30％，且復發率超過23.5％，其中20.0％～62.5％為重度粘連。因此，研究開發安全、有效的新的臨床治療方案一直是該領域的熱點和難點問題。

間充質干細胞(mesenchymal stem cells，MSCs)是一類具有自我復制和多向分化潛能的成體干細胞，在再生醫學領域發揮著非常廣泛的作用。MSCs具有多向分化潛能、抑制炎癥、歸巢能力、免疫原性低、來源廣泛、易于分離、培養擴增和無倫理學限制等優勢，成為再生醫學理想的細胞來源。近年來，國內外初步研究結果顯示，MSCs能修復受損子宮內膜，改善其功能，并恢復部分生育能力，為宮腔粘連的治療提供了新的治療策略，為IUA患者帶來新的希望。

干細胞是再生醫學發展的基礎，其有效的應用是實現人類健康長壽、防癌抗衰、永保年輕狀態、持續提高生活質量等終極夢想的有效方法。近年來，胚胎干細胞與成體干細胞在細胞生物學以及再生醫學研究領域倍受重視。然而，盡管胚胎干細胞具有其他細胞無法企及的全能性，但致瘤性、同種異體移植后的免疫排斥性以及無法避免的倫理爭議等因素在很大程度上限制了其在臨床的應用，而成體干細胞在組織中含量較少，缺乏特異性的表面標志的特點也成為其臨床應用的桎梏。

由于干細胞的多項分化潛能及其分泌多種細胞因子的功能，備受研究者的青睞。近年來，干細胞在組織損傷與修復中的應用越來越廣泛，而干細胞的來源一直是人們關注的焦點。骨髓間充質干細胞是較早被認識的成體干細胞之一。但由于抽取骨髓給患者帶來痛苦，而且骨髓干細胞的含量極少，使大量獲得受到限制。其他來源如脂肪組織，皮膚組織等都需取材于人體自體或異體組織，也不易取材或可能涉及倫理問題。

人羊膜來源于人胎盤組織，無血管、神經及淋巴，具有一定的彈性，厚0.02-0.5mm，在電鏡下，其分為5層：上皮層、基底膜、致密層、纖維母細胞層和海綿層。羊膜屬于孕婦生產后的廢棄物，一個胎盤的羊膜面積大約有600cm²，而且羊膜易于從胎盤上剝離，所以因羊膜具有取材方便，原料充足的特點而被認為是目前間充質干細胞的最佳來源之一。