[發明專利]EGFR的親和力成熟結合蛋白及應用

有效

• 申請號: 202011567453.4
• 申請日: 2020-12-25
• 公開（公告）號: CN112646035B
• 公開（公告）日: 2022-06-24
• 發明（設計）人: 魏星;陳濤
• 申請（專利權）人: 暨南大學
• 主分類號: C07K16/28
• 分類號: C07K16/28;C12N15/13;C12N15/70;A61K39/395;A61P35/00;A61P37/00;C12R1/19
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 蘇運貞

本發明公開了一種抗人EGFR的親和力成熟結合蛋白及應用。該親和力成熟結合蛋白是氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示的aEG22C4親和力成熟結合蛋白；或是氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的aEG12E2親和力成熟結合蛋白、氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示的aEG13E8親和力成熟結合蛋白和氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的aEG11A6親和力成熟結合蛋白中的至少一種與aEG22C4親和力成熟結合蛋白組合形成的結合蛋白。該親和力成熟結合蛋白具有高親和力、高特異性和低免疫原性，并且具有較好的穩定性，結構簡單，易于進行工程化改造等優點，可更好地應用于結合蛋白藥物的開發。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，涉及一種人EGFR的親和力成熟結合蛋白及應用。

背景技術

癌癥這一名詞在公元前400多年就被提出，經過2000多年依然沒有被攻克，如今對人類健康的威脅愈加明顯。近年來，研究發現表皮生長因子(EGFR)在多種實體瘤細胞中過表達，并在癌癥的發生、發展過程中發揮重要的作用。EGFR過表達與多種癌癥預后差和耐藥性正相關。EGFR在癌細胞中過表達導致EGFR/EGF信號通路的持續性激活，從而促進癌細胞的增殖、遷移及侵襲活動，還可以促進VEGF因子的分泌，誘導癌組織微環境血管形成。目前，靶向EGFR的單克隆抗體在非小細胞肺癌的臨床治療取得了較好的效果，但由于是嵌合型抗體，所以存在一定的免疫源性，并且由于其分子量大滲透能力差，不能有效清除微小病灶。

親和力成熟結合蛋白是一種只含有單個結構域的基因工程抗體，能夠以高親和力和特異性與抗原結合。親和力成熟結合蛋白由于其分子量小，便于在大腸桿菌中表達，大大降低了生產的成本。同時，親和力成熟結合蛋白結構簡單，具有較高的組織滲透能力，也利于對其進一步改造。因此，抗EGFR親和力成熟結合蛋白在EGFR靶向的癌癥治療中，具有很高的醫學應用價值。

發明內容

本發明的首要目的在于克服現有技術的缺點與不足，提供一種抗人EGFR的親和力成熟結合蛋白。

本發明的另一目的在于提供上述抗人EGFR的親和力成熟結合蛋白的應用。

本發明的目的通過下述技術方案實現：一種人EGFR的親和力成熟結合蛋白，是aEG22C4親和力成熟結合蛋白；或是aEG12E2親和力成熟結合蛋白、aEG13E8親和力成熟結合蛋白和aEG11A6親和力成熟結合蛋白中的至少一種與aEG22C4親和力成熟結合蛋白組合形成的結合蛋白；

所述的aEG11A6親和力成熟結合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示；

所述的aEG12E2親和力成熟結合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示；

所述的aEG13E8親和力成熟結合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示；

所述的aEG22C4親和力成熟結合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示。

編碼上述抗人EGFR的親和力成熟結合蛋白的核苷酸序列，是編碼所述的aEG22C4親和力成熟結合蛋白的核苷酸序列；或是編碼所述的aEG12E2親和力成熟結合蛋白的核苷酸序列、編碼所述的aEG13E8親和力成熟結合蛋白的核苷酸序列和編碼所述的aEG11A6親和力成熟結合蛋白的核苷酸序列中的至少一種與編碼所述的aEG22C4親和力成熟結合蛋白的核苷酸序列組合形成的核苷酸序列。

編碼所述的aEG11A6親和力成熟結合蛋白的核苷酸序列優選如SEQ ID NO:8所示。

編碼所述的aEG12E2親和力成熟結合蛋白的核苷酸序列優選如SEQ ID NO:9所示。

編碼所述的aEG13E8親和力成熟結合蛋白的核苷酸序列優選如SEQ ID NO:10所示。

編碼所述的aEG22C4親和力成熟結合蛋白的核苷酸序列優選如SEQ ID NO:11所示。