[發(fā)明專利]一種用于檢測(cè)玉米植物ND4403的核酸分子及其檢測(cè)方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011565284.0
• 申請(qǐng)日: 2020-12-25
• 公開（公告）號(hào): CN112481412A
• 公開（公告）日: 2021-03-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 郝東云;柳青;劉相國(guó);郭嘉;尹悅佳;劉洋;趙涵;寧麗華;陳子奇;韓四平;李毅丹;葉欣男
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 吉林省農(nóng)業(yè)科學(xué)院
• 主分類號(hào): C12Q1/6895
• 分類號(hào): C12Q1/6895;C12N15/11;C12N15/82;C12N15/54;C12N15/55;A01H5/00;A01H5/10;A01H6/46
• 代理公司: 咸寧鴻信專利代理事務(wù)所(普通合伙) 42249
• 代理人: 汪彩彩

1.一種核酸分子，其特征在于，序列包括如下任意一種：

i)包含SEQ ID NO:1和/或SEQ ID NO:2所示序列，或其互補(bǔ)序列；

ii)包含SEQ ID NO:3所示序列，或其互補(bǔ)序列；

ii)包含SEQ ID NO:4所示序列，或其互補(bǔ)序列；

iii)包含SEQ ID NO:5所示序列，或其互補(bǔ)序列。

2.用于檢測(cè)玉米轉(zhuǎn)化事件的探針，其特征在于，包括SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2或SEQID NO:3或SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:5所示序列或其片段或其變體或其互補(bǔ)序列。

3.用于檢測(cè)玉米轉(zhuǎn)化事件的引物對(duì)，其特征在于，所述引物對(duì)包括：

特異性識(shí)別SEQ ID NO:5所示序列第1-647位核苷酸序列的一條引物和特異性識(shí)別SEQID NO:5所示序列第648-5737位核苷酸序列的一條引物；和/或

特異性識(shí)別SEQ ID NO:5所示序列第648-5737位核苷酸序列的一條引物和特異性識(shí)別SEQ ID NO:5所示序列第5738-6093位核苷酸序列的一條引物；

任選地，所述引物對(duì)的擴(kuò)增產(chǎn)物包含權(quán)利要求2所述的序列；

任選地，所述引物對(duì)為SEQ ID NO:6和SEQ ID NO:7所示的序列或其互補(bǔ)序列；或SEQID NO:8和SEQ ID NO:9所示的序列或其互補(bǔ)序列。

4.用于檢測(cè)玉米轉(zhuǎn)化事件的試劑盒或微陣列，其特征在于，包含權(quán)利要求2所述的探針和/或權(quán)利要求3所述的引物對(duì)。

5.檢測(cè)玉米轉(zhuǎn)化事件的方法，其特征在于，包括利用以下來(lái)檢測(cè)待測(cè)樣品中是否存在所述轉(zhuǎn)化事件：

i)權(quán)利要求2所述的探針；

ii)權(quán)利要求3所述的引物對(duì)；

iii)權(quán)利要求2所述的探針和權(quán)利要求3所述的引物對(duì)；或者

iv)權(quán)利要求4所述的試劑盒或微陣列。

6.對(duì)玉米進(jìn)行育種的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：

1)獲得包含權(quán)利要求1所述核酸分子的玉米；

2)將步驟1)所獲得的玉米通過(guò)花粉培養(yǎng)、未受精胚培養(yǎng)、加倍培養(yǎng)、細(xì)胞培養(yǎng)、組織培養(yǎng)、自交或雜交或以上的組合得到玉米植物、種子、植物細(xì)胞、后代植物或植物部分；以及任選地，

3)對(duì)步驟2)所獲得的后代植物進(jìn)行氮缺乏耐性鑒定和/或產(chǎn)量性狀鑒定，并利用權(quán)利要求5所述的方法來(lái)檢測(cè)其中是否存在所述轉(zhuǎn)化事件。

7.利用權(quán)利要求6所述方法獲得的玉米植物、種子、植物細(xì)胞、后代植物或植物部分制成的制品，包括食品、飼料或工業(yè)原料。

8.一種提高玉米產(chǎn)量和/或氮缺乏耐受性的方法，其特征在于，包括在土壤中種植至少一種轉(zhuǎn)基因玉米植物，所述轉(zhuǎn)基因玉米植物的基因組中包含SEQ ID NO:5第2243-6093位核酸，或者所述轉(zhuǎn)基因玉米植物的基因組中包含SEQ ID NO:5；所述轉(zhuǎn)基因玉米植物具有高產(chǎn)和/或氮缺乏耐受性狀。

9.提高玉米產(chǎn)量和/或氮缺乏耐受性的方法，其特征在于，將如SEQ ID NO:5的第2243-5439位核苷酸所示序列的表達(dá)氮高效利用基因的表達(dá)盒導(dǎo)入玉米基因組中。