[發(fā)明專(zhuān)利]一種微小RNA分子及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011563128.0
• 申請(qǐng)日: 2020-12-25
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN112646815B
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-12-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 馮世鵬;鄭運(yùn)天;劉歡;周霞;李慧萍;牛曉磊
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 海南大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): C12N15/113
• 分類(lèi)號(hào): C12N15/113;C12N15/84;A01H5/06;A01H5/04;A01H5/02;A01H5/12;A01H5/08;A01H6/20;A01H6/38
• 代理公司: 蘇州中合知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 32266
• 代理人: 李斌

本發(fā)明公開(kāi)了一種微小RNA分子及其應(yīng)用。miRNA分子的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，miRNA分子的前體的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，miRNA分子的初級(jí)前體的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。本發(fā)明發(fā)現(xiàn)將上述miRNA分子或其前體(pre?miRNA)或者初級(jí)前體(pri?miRNA)導(dǎo)入植物體內(nèi)，從而增大植物根、莖、葉、花、果等器官，使轉(zhuǎn)基因植物生長(zhǎng)旺盛，增加產(chǎn)量，提高抗病性，在植物育種領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用前景。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種微小RNA分子及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

微小RNA分子(miRNA)是一類(lèi)長(zhǎng)度約22個(gè)堿基的單鏈非編碼小RNA分子，在物種中有較高的保守性，在動(dòng)物、植物、真菌、病毒中均發(fā)現(xiàn)有miRNA存在。miRNA在生物體內(nèi)有三種存在形式：初級(jí)前體(pri-miRNA)、前體(pre-miRNA)、miRNA。miRNA在不同生物體均由基因編碼，miRNA基因可分布于生物體全部染色體上，且常成簇排布。動(dòng)物miRNA序列長(zhǎng)度集中在22個(gè)堿基，植物miRNA集中在24個(gè)堿基；動(dòng)物pre-miRNA長(zhǎng)度約100堿基，植物pre-miRNA長(zhǎng)度變異較大長(zhǎng)度變化在60-600個(gè)堿基。

植物miRNA基因被II型RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄為pri-miRNA；其在細(xì)胞核內(nèi)被加工為pre-miRNA或成熟的miRNA；pre-miRNA或者成熟的miRNA被細(xì)胞核膜上的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白運(yùn)送至細(xì)胞質(zhì)；在細(xì)胞質(zhì)中，pre-miRNA可進(jìn)一步加工為成熟miRNA；成熟miRNA與Ago蛋白及其它相關(guān)蛋白結(jié)合構(gòu)建miRISC沉默復(fù)合體，并以降解靶基因mRNA的方式調(diào)控靶基因的表達(dá)。

橡膠樹(shù)是天然橡膠的主要來(lái)源，目前在miRBase(版本22.1，2018年10月釋放)發(fā)現(xiàn)的橡膠樹(shù)的miRNA有30個(gè)，前體也是30個(gè)；擬南芥的miRNA428個(gè)，前體326個(gè)(Kozomara A,Birgaoanu M,Griffiths-Jones S.miRBase:from microRNA sequences tofunction.Nucleic Acids Res 201947:D155-D162)；橡膠樹(shù)的miRNA數(shù)目和功能有待進(jìn)一步研究。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的第一個(gè)目的是提供一種能夠增大植物根、莖、葉、花、果等器官，使轉(zhuǎn)基因植物生長(zhǎng)旺盛，增加產(chǎn)量，提高抗病性的miRNA分子或其前體(pre-miRNA)或者初級(jí)前體(pri-miRNA)。

本發(fā)明通過(guò)將一種miRNA分子或其前體(pre-miRNA)或者初級(jí)前體(pri-miRNA)導(dǎo)入植物體內(nèi)，從而增大植物根、莖、葉、花、果等器官，使轉(zhuǎn)基因植物生長(zhǎng)旺盛，增加產(chǎn)量，提高抗病性。

因此，本發(fā)明提供了一種miRNA分子或其前體(pre-miRNA)或者初級(jí)前體(pri-miRNA)，所述的miRNA分子的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

進(jìn)一步地，所述的miRNA分子的前體的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

更進(jìn)一步地，所述的miRNA分子的初級(jí)前體的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。

本發(fā)明的第二個(gè)目的是提供上述miRNA分子或其前體(pre-miRNA)或者初級(jí)前體(pri-miRNA)在使植物生長(zhǎng)旺盛、增加產(chǎn)量或提高抗病性中的應(yīng)用，如在制備使植物生長(zhǎng)旺盛、增加產(chǎn)量或提高抗病性的制劑中進(jìn)行應(yīng)用。具體使用是將miRNA分子或其前體或者初級(jí)前體導(dǎo)入植物體內(nèi)，使植物生長(zhǎng)旺盛、增加產(chǎn)量或提高抗病性中的應(yīng)用。

進(jìn)一步地，所述的使植物生長(zhǎng)旺盛是增大植物根、莖、葉、花、果等器官。

進(jìn)一步地，所述的抗病性是抗黃單胞菌。

進(jìn)一步地，所述的植物可以是橡膠樹(shù)或擬南芥。