[發明專利]一種熒光化合物及其制備方法、用途

有效

• 申請號: 202011508102.6
• 申請日: 2020-12-18
• 公開（公告）號: CN112457303B
• 公開（公告）日: 2022-01-07
• 發明（設計）人: 覃旅娜;陳慶國;劉梅;楊金生;高志偉
• 申請（專利權）人: 浙江海洋大學
• 主分類號: C07D409/06
• 分類號: C07D409/06;C07F9/6558;C09K11/06;G01N21/64
• 代理公司: 北京國翰知識產權代理事務所(普通合伙) 11696
• 代理人: 周蕓蕓

本發明公開了一種熒光化合物及其制備方法、用途，涉及熒光有機化合物技術領域。該熒光化合物的制備，具體包括：取4?羥基?苯并[b]噻吩?7?羧醛、乙基苯并吲哚加入的正丁醇/甲苯的混合溶液攪拌溶解，加熱回流反應；反應結束后除去溶劑，在水和二氯甲烷的混合體系中靜置分層，有機相進一步純化，得到的熒光化合物。本發明制得的熒光化合物在不同的酸堿環境中，均具有敏銳的響應；基于此制得的熒光探針，可用于檢測環境中的ALP，排除其它物質的影響，具有高選擇性、專一性和靈敏度。

技術領域

本發明屬于熒光有機化合物技術領域，具體涉及一種熒光化合物及其制備方法、用途。

背景技術

熒光，是指一種光致發光的冷發光現象。當常溫物質經某種波長的入射光(通常是紫外線或X射線)照射后，吸收光能，進入激發態，并發出比入射光的波長長的出射光(通常波長在可見光波段)。物質的熒光非常容易受外界條件刺激(如熱、氣體、水等)而發生變化(如紅移，藍移或者強度變化等)。

在包括化學和生物學的許多領域，熒光技術受到的關注日益增多。在某些情況中，熒光分子可用于檢測食品和環境樣品中是否存在分析物或化學品。在離體生化分析(如DNA測序和血糖定量)中，需要一些靈敏的熒光定量檢測設備。在一些情況中，具有合適的光化學性質的熒光探針可用于示蹤活細胞中的分子和生理學事件，以及用于高通量篩選。一般地，熒光技術比其他類型的光學測量更簡單，并可提供更高的靈敏度和更多的分子信息。熒光測量一般是高度靈敏的，因為大多數化學和生物樣品中發現的熒光背景一般處于低水平。隨著熒光儀器(如共焦和多光子熒光顯微鏡)領域最近取得的進展，細胞事件的實時三維成像和生物物質的實時動力學研究已經變得可能。盡管有以上提及的優點，但將熒光技術用于特定應用的可行性往往可受到適當熒光分子的可利用性的限制。

磷酸鹽被認為是藻類和細菌最重要的磷的來源，海水中的磷的缺乏會限制藻類的生長，限制海域的初級生產力，進而影響整個生態循環系統。早有研究表明，當海水缺乏無機磷時，水體中溶解有機磷(DOP)化合物可以作為磷營養源被藻類和細菌所利用，這便是海水中ALP的貢獻。最近，各種檢測ALP檢測手段已經被開發，包括電化學、色譜、比色技術及肽微陣列分析等等。雖然這些為ALP檢測提供了有效的方法，但是對于底物，并沒有良好的專一性，其中，有一個不可忽視的威脅來自于磷酸單酯酶中的酸性磷酸酶，這是由于堿性磷酸酶和酸性磷酸酶是一類對底物沒有專一性水解功能的酶類，他們有著不同的最適pH值。

與傳統花菁染料相比，半花菁染料耐光性好，熒光量子產率高，更有利于成像。半花菁染料已被設計合成，并用于檢測硒化氫，肼，半胱氨酸，pH，一氧化氮，β-內酰胺酶，硒醇，超氧根離子，硝基還原酶等，而基于pH值響應的熒光探針檢測環境中的ALP活性幾乎未見有報道，因此設計一種基于pH值的具有高選擇性的熒光探針CyP用于檢測ALP活性是非常重要的。

發明內容

本發明的目的在于提供一種熒光化合物及其制備方法、用途，該熒光化合物在較寬的pH范圍內具有敏銳的信號響應，制得的熒光探針對ALP的檢測具有較高的選擇性、特異性和靈敏度。

本發明為實現上述目的所采取的技術方案為：

一種熒光化合物，其結構式如下所示：

本發明獲得的熒光化合物，使得半花菁的熒光發射信號紅移，在pH變化范圍2.5～9.5時，有著敏銳的比率信號的改變，在pH為8的環境下，化合物在550nm的激發波長下，具有明顯的信號強度，隨著pH值的變化，其吸光度明顯衰退，且信號強度具有明顯的區別，可適用不同酸堿性環境；相比于現有技術，信號強度更高，增強其靈敏度。因而可用于設計基于pH值響應的熒光強度信號改變的熒光探針，高選擇性檢測環境中的堿性磷酸酶(ALP)活性，在保證ALP的最大活力的同時，降低了其它物質的干擾，具有優異的選擇性。本發明熒光化合物采用一鍋法即可制得，方法簡單，且產率較高。

上述熒光化合物的制備方法，包括：