[發明專利]一種基因治療載體及其用途

有效

• 申請號: 202011486921.5
• 申請日: 2020-12-16
• 公開（公告）號: CN112522321B
• 公開（公告）日: 2022-04-08
• 發明（設計）人: 魯薪安;何霆;齊菲菲;劉光華;胡雪蓮
• 申請（專利權）人: 北京藝妙神州醫藥科技有限公司;北京藝妙醫療科技有限公司
• 主分類號: C12N15/867
• 分類號: C12N15/867;C12N15/12;C12N5/10;A61K48/00;A61K38/17;A61P25/00;A61P25/28;A61P25/14
• 代理公司: 北京北翔知識產權代理有限公司 11285
• 代理人: 張擁;張廣育

本發明涉及一種基因治療載體及其用途，該基因治療載體包括：a)左(5′)LTR；b)Psi(ψ)包裝信號；c)逆轉錄病毒輸出元件；d)中心多嘌呤區/中央終止序列；e)與編碼集落刺激因子1受體多肽的多核苷酸可操作地連接的啟動子；f)編碼集落刺激因子1受體多肽的多核苷酸；g)轉錄后調控元件；以及h)右(3′)LTR。該基因治療載體能夠體外改造細胞，使細胞表達CSF1R蛋白，從而治療HDLS，改善HDLS患者的生存狀態。

技術領域

本發明涉及基因治療技術領域，尤其涉及一種基因治療載體及其用途。

背景技術

遺傳性彌漫性白質腦病合并軸索球樣變(HDLS，hereditary diffuseleukoencephalopathy with spheroids)由瑞典醫生在1984年首次描述。臨床表現包括認知障礙(記憶力下降、言語障礙等)，人格行為改變(抑郁、淡漠、焦慮、易激怒等)，運動功能障礙(行走困難、行動失調、共濟失調等)，容易誤診為艾爾茲海默病、額顳葉癡呆、帕金森綜合征、多發性硬化及腦白質病。發病年齡為47.2±14.5歲，平均病程6.0±3.1年，死亡年齡為57.2±13.1歲。病理表現為額葉、額頂葉萎縮，腦室擴張，腦白質變形，可觀察到髓鞘、軸突丟失以及大量的軸索球樣變。目前臨床尚無有效的HDLS治療方法，一般以對癥治療為主，主要包括一般護理、營養支持、抗癇藥物及抗生素使用。而對癥治療的方法并不能根治疾病，只能輕微緩解患者癥狀。因此，急需新的治療方法以改善HDLS患者的生存狀態。

發明內容

有鑒于此，本發明的目的是提出一種基因治療載體及其用途，該基因治療載體能夠體外改造細胞，使細胞表達集落刺激因子1受體(CSF1R)蛋白，從而治療HDLS，改善HDLS患者的生存狀態。

基于上述目的，本發明的第一個方面提供了一種基因治療載體，該基因治療載體用于治療HDLS，其包括：

a)左(5′)LTR；

b)Psi(ψ)包裝信號；

c)逆轉錄病毒輸出元件；

d)中心多嘌呤區/中央終止序列；

e)與編碼集落刺激因子1受體多肽的多核苷酸可操作地連接的啟動子；

f)編碼集落刺激因子1受體多肽的多核苷酸；

g)轉錄后調控元件；以及

h)右(3′)LTR。

在本發明的優選的實施方案中，其中，所述基因治療載體可以是γ逆轉錄病毒載體、腺關聯病毒(AAV)載體、腺病毒載體或皰疹病毒載體；

優選地，所述基因治療載體為慢病毒載體。

在本發明的優選的實施方案中，其中，所述慢病毒選自以下：人類免疫缺陷病毒(HIV)、維斯納-梅迪病毒(VMV)、山羊關節炎-腦炎病毒(CAEV)、馬傳染性貧血病毒(EIAV)、貓免疫缺陷病毒(FIV)、牛免疫缺陷病毒(BIV)或猿猴免疫缺陷病毒(SIV)；

優選地，所述慢病毒為人類免疫缺陷病毒(HIV)。

在本發明的優選的實施方案中，其中，上述基因治療載體還包括編碼表達標簽的核苷酸序列；

優選地，所述表達標簽為截短的表皮生長因子受體、螢火蟲熒光素酶、增強的綠色熒光蛋白、鏈霉親和素結合肽標簽(Strep tag II)或Flag標簽(Flag tag)。

在本發明的優選的實施方案中，其中，所述左(5′)LTR的啟動子由選自以下的異源啟動子替換：巨細胞病毒(CMV)啟動子、勞斯肉瘤病毒(RSV)啟動子或猿猴病毒40(SV40)啟動子。

在本發明的優選的實施方案中，其中，所述右(3′)LTR包括一個或多個修飾；