[發明專利]一種從黃柏中提取的具有抗炎活性的異喹啉生物堿苷類化合物及其制備方法與應用

有效

• 申請號: 202011485356.0
• 申請日: 2020-12-16
• 公開（公告）號: CN112538100B
• 公開（公告）日: 2022-06-24
• 發明（設計）人: 郭濤;昌軍;司彥坡;魏文君;賀帥博;張明月;李宇軒;謝小龍
• 申請（專利權）人: 河南中醫藥大學
• 主分類號: C07H17/02
• 分類號: C07H17/02;C07H1/08;A61P29/00
• 代理公司: 鄭州天陽專利事務所(普通合伙) 41113
• 代理人: 聶孟民

1.一種具有抗炎活性的異喹啉生物堿苷類化合物，其特征在于，該化合物命名為黃柏堿苷，分子結構式是：

2.權利要求1所述的具有抗炎活性的異喹啉生物堿苷類化合物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)、將黃柏用溶劑提取，黃柏與溶劑每次以質量比為1︰8-16提取2次，過濾，合并濾液，減壓濃縮，得50℃相對密度為1.2-1.4的粗浸膏；

所述的溶劑為乙醇、甲醇或者丙酮中的任一種；

所述的提取是冷浸法、滲漉法、微波提取法、超聲提取法、回流提取法；

(2)、將步驟(1)所得粗浸膏用水混懸，用有機溶劑進行萃取，剩余水溶液采用硅藻土過濾，濃縮后獲得50℃相對密度為1.2-1.4的萃余物浸膏；或者將步驟(1)所得粗浸膏進行大孔樹脂洗脫，濃縮洗脫液，得50℃相對密度為1.2-1.4的大孔樹脂洗脫浸膏；

所述的有機溶劑為石油醚、乙酸乙酯、正丁醇；

所述的大孔樹脂為D101、XDA-8、XDA-1或LSA-8的一種，用水、10％-95％乙醇或甲醇梯度洗脫，以體積分數計，分別洗脫2-3個柱體積；

(3)、將萃余物浸膏或大孔樹脂洗脫浸膏先進行MCI樹脂柱色譜洗脫，洗脫液濃縮至50℃相對密度為1.2-1.4的浸膏，再依次進行凝膠柱色譜、反向柱色譜分離，凝膠柱色譜分離物，即為具有抗炎活性的異喹啉生物堿苷類化合物；

所述的MCI樹脂柱為GEL CHP 55A、GEL CHP 70Y、GEL CHP 2MG、GEL CHP P20或GEL CHPP30的一種；

所述MCI柱色譜采用水、10％-95％乙醇或甲醇梯度洗脫，最后采用30％-100％丙酮溶液的多個或一個固定濃度進行洗脫，以體積分數計，分別洗脫2-3個柱體積；

所述的凝膠柱為HW-40F、HW-40C或HW-75的一種；

所述凝膠柱色譜的洗脫液梯度洗脫，為純水，10％-60％乙醇或者甲醇溶液進行梯度洗脫，以體積分數計，分別洗脫1個柱體積；

所述反向柱色譜采用20％-60％甲醇或乙醇溶液洗脫，以體積分數計，分別洗脫1-2個柱體積。

3.根據權利要求2所述的具有抗炎活性的異喹啉生物堿苷類化合物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)、將黃柏20kg每次用10倍質量、質量濃度50％乙醇溶液室溫下用冷浸法提取2次，每次7d，過濾，將濾液減壓濃縮至50℃相對密度為1.3的粗浸膏；

(2)、將步驟(1)所得粗浸膏用水混懸，上D101型大孔樹脂柱，混懸液與樹脂按照1︰3的體積比填充，依次用水、質量濃度：10％乙醇、20％乙醇、30％乙醇、50％乙醇、70％乙醇、95％乙醇洗脫，以質量分數計，每個梯度洗脫3個柱體積，合并10％、20％和30％乙醇洗脫部位，并濃縮，得50℃相對密度為1.3的大孔樹脂洗脫樣品；

(3)、將步驟(2)的大孔樹脂洗脫樣品經MCI柱色譜，依次用水、質量濃度：20％乙醇、30％乙醇、50％乙醇、70％乙醇、30％丙酮、60％丙酮洗脫，以質量分數計，每個梯度洗脫3個柱體積，洗脫得到7個流份A、B、C、D、E、F、G；流份G經HW-40C柱色譜，用質量濃度30％乙醇、50％乙醇梯度洗脫，以質量分數計，每個梯度洗脫1個柱體積；得到子流份GA、GB、GC；子流份GB經反相柱色譜C18洗脫，洗脫液為質量濃度30％乙醇、40％乙醇、50％乙醇，60％乙醇，每個梯度洗脫2個柱體積，得子流份GB-A、GB-B、GB-C、GB-D、GB-E；子流份GB-D進行HW-40C凝膠柱色譜，經純水、質量濃度50％甲醇洗脫，以質量分數計，每個梯度洗脫1個柱體積，收集50％甲醇洗脫部分，得具有抗炎活性的異喹啉生物堿苷類化合物。