[發明專利]具有優異修復功效的活力蛋白肽基因及所編碼的蛋白肽

有效

• 申請號: 202011477054.9
• 申請日: 2020-12-14
• 公開（公告）號: CN112625089B
• 公開（公告）日: 2023-01-24
• 發明（設計）人: 鄒弼丞;宋筱葒;楊丹
• 申請（專利權）人: 四川省恩樂生物工程有限公司
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;C12N15/11;C12N15/70;A61K8/64;A61Q19/00;C12R1/19
• 代理公司: 成都帝鵬知識產權代理事務所(普通合伙) 51265
• 代理人: 黎照西

本發明提供一種具有優異修復功效的活力蛋白肽基因，該基因的有效核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示；本發明還提供具有優異修復功能的活力蛋白肽基因編碼的活力蛋白肽(簡稱EL)的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。本發明通過體外基因蛋白重組技術，將活力蛋白肽的基因片段嫁接到遺傳信息載體上，移植到基因工程菌大腸桿菌DH5a菌株中，通過密度發酵、蛋白質分離純化、冷凍干燥，制得了本發明活力肽蛋白，并能保證其活性在凍干狀態下3年不降低。經細胞實驗及人體臨床測試實驗，該蛋白肽對于痘肌修復及醫美術后修復具有優良的效果。本發明活力肽安全性較高，經過微生物檢測、重金屬含量檢測、細胞實驗、安全性得到有效認證；工藝經驗證可行，并可以進行批量化生產。

技術領域

本發明涉及一種適用于化妝品領域的活性肽，具體涉及一種具有優異修復 功效的活力蛋白肽基因及其所編碼的蛋白肽與制備。

背景技術

眾所周知表皮細胞生長因子(Epidermal Growth Factor)簡稱EGF，是人體 內分泌的一種重要細胞生長因子，有很強的生理活性。EGF于1986年被美國科 學家斯坦利·科恩博士發現。EGF是人體內存在的一種生長因子，它的主要功能 是促進皮膚細胞的分裂。研究表明：極微量的EGF能強烈刺激細胞生長，抑制 衰老基因表達，阻止皮膚衰老，使皮膚各組成份保持最佳生理狀態。此外，它還 能刺激細胞外的一些大分子(如透明質酸和膠原蛋白等)的合成與分泌，滋潤皮 膚，是決定皮膚活力和健康的關鍵因素。EGF的發現，揭示了人體皮膚衰老的 奧秘，是人類第一次認識到皮膚的衰老可以逆轉，皮膚可以再變年輕。 但EGF在醫藥以及化妝品領域并未得到廣泛的應用，其原因EGF難以實現批量 化生產：現目前EGF的提取方式主要分為兩種，一種是動物來源，如小鼠下頜、 牛腦等，另外一種則是從干細胞的培養上清液中提取，兩種方法所得到的EGF 的含量都十分的微小，成本極高。另外，通常的EGF的分子量大概為6000道爾 頓，分子量較大，對肌膚的穿透力較差，其功效難以充分發揮。

發明內容

本發明目的之一在于提供一種具有優異修復功能的活力蛋白肽基因。

本發明第二目的在于提供上述活力蛋白肽基因所編碼的活力蛋白肽。

本發明目的按如下方案實現：

一種具有優異修復功效的活力蛋白肽基因，該基因至少含有一個如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。

優選地，一種具有優異修復功效的活力蛋白肽基因，該基因的核苷酸序列如 SEQID NO:1所示。

本發明還提供所述活力蛋白肽基因在制備用于乳液、面膜液、精華液中的活 力蛋白肽中的應用。

上述具有優異修復功能的活力蛋白肽基因編碼的活力蛋白肽(簡稱EL)的 氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。

本發明還提供所述活力蛋白肽在制備用于乳液、面膜液、精華液中的應用。

本發明活力蛋白肽的制備方法：

(1)基因工程菌的構建：該基因工程菌種類為大腸桿菌DH5a菌株。

(2)高密度發酵：菌種濃度為10⁸CFU/mL，發酵溫度為40-42℃，發酵時間 為12-15天。

(3)蛋白質分離純化：對發酵產物進行蛋白質分離純化，留存分子量在 5000～7000道爾頓蛋白肽從而得到本發明活力蛋白肽。

(4)冷凍干燥：預凍溫度為5-10℃，冷凍溫度為-80℃，真空度為15pa。

(5)冷凍干燥后的樣品在-20℃冰箱中保存。