[發明專利]精子質膜保護劑HEPES/BSA及染色液和染色方法在審
| 申請號: | 202011476061.7 | 申請日: | 2020-12-14 |
| 公開(公告)號: | CN112649268A | 公開(公告)日: | 2021-04-13 |
| 發明(設計)人: | 曾長軍;王藝涵;鄧思維;王文燦 | 申請(專利權)人: | 四川農業大學 |
| 主分類號: | G01N1/30 | 分類號: | G01N1/30 |
| 代理公司: | 北京眾合誠成知識產權代理有限公司 11246 | 代理人: | 趙浩竹 |
| 地址: | 611130 四*** | 國省代碼: | 四川;51 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 精子 質膜 保護 hepes bsa 染色 方法 | ||
1.一種精子質膜保護劑HEPES/BSA,其特征在于,該保護劑HEPES/BSA包含:4-羥乙基哌嗪乙磺酸、牛血清白蛋白、D-果糖、氯化鈉、氯化鉀、氯化鈣、氯化鎂和水;其中,所述4-羥乙基哌嗪乙磺酸、牛血清白蛋白、D-果糖、氯化鈉、氯化鉀、氯化鈣和氯化鎂的濃度分別為10mmol·L-1、1g·L-1、14mmol·L-1、130mmol·L-1、4mmol·L-1、1mmol·L-1、0.5mmol·L-1。
2.一種穩定高效檢測精子活率的染色液,其特征在于,該染色液包含:臺盼藍和如權利要求1所述的精子質膜保護劑HEPES/BSA;其中,所述臺盼藍的濃度為0.4~0.8%。
3.根據權利要求2所述的染色液,其特征在于,所述臺盼藍和HEPES/BSA保護液用量比為1~2g:125mL。
4.一種穩定高效檢測精子活率的方法,其特征在于,該方法采用如權利要求2或3所述的染色液對待檢測的精子樣品進行染色。
5.根據權利要求4所述的方法,其特征在于,該方法包含:將待檢測精子樣品與所述染色液以體積比1:1混合,于37℃或室溫下染色,染色結束后取溶液涂在載玻片上,在顯微鏡下觀察拍照,統計死亡精子數和總精子數,求出精子活率。
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