[發明專利]一種甲氧基腎上腺素發光免疫檢測試劑盒

在審

• 申請號: 202011458814.1
• 申請日: 2020-12-11
• 公開（公告）號: CN112578119A
• 公開（公告）日: 2021-03-30
• 發明（設計）人: 許君艷;莊路陽;王丹;楊敏
• 申請（專利權）人: 鄭州安圖生物工程股份有限公司
• 主分類號: G01N33/58
• 分類號: G01N33/58;G01N33/543;G01N33/74
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 潘穎

1.一種甲氧基腎上腺素發光免疫檢測試劑盒，其特征在于，包括樣品前處理試劑和檢測試劑；

所述樣本前處理試劑包含：酸化液、酰化緩沖液、酰化劑溶液；所述酰化劑溶液中的酰化劑為乙酸酐、琥珀酸酐、丁酸酐、己酸酐、辛酸酐、乙酰氯、冰醋酸中的一種或幾種；

所述檢測試劑包含：包被有甲氧基腎上腺素的磁微粒混懸液，甲氧基腎上腺素的特異性抗體溶液，含有辣根過氧化物酶標記抗抗體的酶結合物溶液，校準品；

或者，所述檢測試劑包含：包被有甲氧基腎上腺素的磁微粒混懸液，含有辣根過氧化物酶標記的甲氧基腎上腺素特異性抗體的酶結合物溶液，校準品。

2.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述酸化液為pH2、含有酚紅指示劑的強酸溶液，所述強酸為鹽酸、硫酸中的一種，濃度為0.1～0.5M；酸化液中酚紅指示劑的含量為0.0001vt％～0.01vt％。

3.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述酰化緩沖液為Bis-Tris、Tris、PBS中的一種，濃度為0.1～10M，pH8.0～9.0。

4.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述酰化劑溶液中的溶劑為DMF、DMSO、無水乙醇中的一種或幾種；所述酰化劑溶液中的溶劑與酰化劑的體積比為(50～70)：1。

5.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述甲氧基腎上腺素的特異性抗體溶液中，甲氧基腎上腺素的特異性抗體的體積百分濃度為0.001％～1％。

6.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，甲氧基腎上腺素的特異性抗體溶液中，所用的抗體稀釋液由稀釋緩沖液、保護蛋白、防腐劑組成；抗體稀釋液中稀釋緩沖液的濃度為0.01～0.1M，保護蛋白的質量體積百分比為0.5％～5％，防腐劑的體積百分含量為0.01％～1％；

所述稀釋緩沖液為Bis-Tris、Tris-NaCl、PBS中的一種，pH3.0～8.0；

所述保護蛋白為牛血清白蛋白、牛血清、人血清、明膠、酪蛋白中的一種或兩種；

所述防腐劑為ProClin300、BRONIDOX、MIT、NaN₃的任意組合。

7.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述酶結合物溶液由辣根過氧化物酶標記的抗抗體、酶稀釋液組成；

或者，所述酶結合物溶液由辣根過氧化物酶標記的甲氧基腎上腺素特異性抗體、酶稀釋液組成；

所述酶稀釋液由稀釋緩沖液、保護蛋白組成；

所述稀釋緩沖液為Bis-Tris、Tris-NaCl、PBS中的一種，pH3.0～8.0；

所述保護蛋白的質量體積百分比為0.5％～5％，保護蛋白為牛血清白蛋白、牛血清、人血清、明膠、酪蛋白中的一種或兩種。

8.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述包被有甲氧基腎上腺素的磁微粒混懸液制備時所使用的甲氧基腎上腺素偶聯有載體蛋白，所述載體蛋白為牛血清白蛋白、鑰孔血藍蛋白、卵清白蛋白中的一種或幾種；

磁微粒混懸液制備時所使用的甲氧基腎上腺素濃度為0.5～5μg/mL；

所述校準品為含有甲氧基腎上腺素的PBS溶液，校準品中甲氧基腎上腺素的濃度為0～5000ng/mL；校準品中PBS溶液的pH控制在2～4。

9.根據權利要求1至8中任一項所述的試劑盒，其特征在于，采用所述樣本前處理試劑進行發光免疫檢測的步驟為：

取待測樣本，加入酸化液，混勻后在80～100℃孵育20～40min；孵育結束后，待酸化樣本冷卻至室溫，加入酰化緩沖液，混勻；再加入酰化劑，混勻后室溫靜置至少15min。

10.根據權利要求9所述的試劑盒，其特征在于，待測樣本、酸化液、酰化緩沖液、酰化劑的體積比為(50～150)：(200～300)：(200～300)：(20～30)。