[發(fā)明專利]副氧化微桿菌在誘導(dǎo)少孢節(jié)叢孢產(chǎn)生捕食器官中的應(yīng)用及方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011454872.7
• 申請日: 2020-12-09
• 公開（公告）號: CN112522115B
• 公開（公告）日: 2022-09-02
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李國紅;鄭橋妹;王芯;張克勤
• 申請（專利權(quán)）人: 云南大學(xué)
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12N1/38;C12N1/20;C12R1/645;C12R1/01
• 代理公司: 成都東恒知盛知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 51304
• 代理人: 何健雄;廖祥文

本發(fā)明屬于微生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及副氧化微桿菌在誘導(dǎo)少孢節(jié)叢孢產(chǎn)生捕食器官中的應(yīng)用及方法。本發(fā)明所述方法包括副氧化微桿菌(Microbacterium paraoxydans)發(fā)酵上清液的制備；少孢節(jié)叢孢(Arthrobotrys oligospora)的孢子懸液的制備；將副氧化微桿菌發(fā)酵液的上清液與制備得到的孢子懸液混勻，培養(yǎng)即得。本發(fā)明首次發(fā)現(xiàn)副氧化微桿菌的發(fā)酵液可有效誘導(dǎo)少孢節(jié)叢孢產(chǎn)生捕食器官，本發(fā)明采用副氧化微桿菌的發(fā)酵液誘導(dǎo)少孢節(jié)叢孢產(chǎn)生捕食器官的方法更有利于推廣應(yīng)用，為生物防治線蟲的有效實施提供可能。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于微生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及副氧化微桿菌在誘導(dǎo)少孢節(jié)叢孢產(chǎn)生捕食器官中的應(yīng)用及方法。

背景技術(shù)

寄生線蟲每年給全球造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失，化學(xué)防治由于破壞生態(tài)環(huán)境，容易造成寄生線蟲的抗藥性，并在農(nóng)產(chǎn)品和畜產(chǎn)品中殘留，因此生物防治線蟲受到關(guān)注。捕食線蟲真菌通過營養(yǎng)菌絲特化形成粘性菌網(wǎng)、粘性球、粘性分枝、粘性菌絲、冠囊體、收縮環(huán)等捕食器官捕殺線蟲，是線蟲生防的重要來源之一。捕食器官是捕食線蟲真菌捕食線蟲的重要武器，其形成與否以及形成多少都將影響捕食線蟲真菌的捕食效果，在線蟲生防上有重要的應(yīng)用價值。

少孢節(jié)叢孢(Arthrobotrys oligospora)是捕食線蟲真菌的模式種，其產(chǎn)生粘性菌網(wǎng)來捕捉線蟲，目前有報道氨基酸、多肽等能誘導(dǎo)少孢節(jié)叢孢(A.oligospora)產(chǎn)生三維菌網(wǎng)，氨基酸、多肽等有的價格較高，有的不易獲取，不利于大規(guī)模推廣應(yīng)用。因而，尋找一種可有效誘導(dǎo)少孢節(jié)叢孢產(chǎn)生捕食器官并可廣泛推廣應(yīng)用的方法，對于生物防治線蟲的有效實施具有重要的意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明主要目的是提供副氧化微桿菌在誘導(dǎo)少孢節(jié)叢孢產(chǎn)生捕食器官中的應(yīng)用及方法。本發(fā)明首次發(fā)現(xiàn)副氧化微桿菌的發(fā)酵液可有效誘導(dǎo)少孢節(jié)叢孢產(chǎn)生捕食器官，并且副氧化微桿菌的發(fā)酵液易于獲得且可大規(guī)模生產(chǎn)，因而本發(fā)明采用副氧化微桿菌的發(fā)酵液誘導(dǎo)少孢節(jié)叢孢產(chǎn)生捕食器官的方法更有利于推廣應(yīng)用。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：

本發(fā)明提供副氧化微桿菌(Microbacterium paraoxydans)在誘導(dǎo)少孢節(jié)叢孢(Arthrobotrys oligospora)產(chǎn)生捕食器官中的應(yīng)用。

進(jìn)一步地，所述捕食器官為三維菌網(wǎng)。

本發(fā)明還提供一種誘導(dǎo)少孢節(jié)叢孢(Arthrobotrys oligospora)產(chǎn)生捕食器官的方法，所述方法包括以下步驟：

副氧化微桿菌(Microbacterium paraoxydans)發(fā)酵上清液的制備；

少孢節(jié)叢孢(Arthrobotrys oligospora)的孢子懸液的制備；

將副氧化微桿菌發(fā)酵液的上清液與制備得到的孢子懸液混勻，培養(yǎng)即得。

進(jìn)一步地，副氧化微桿菌(Microbacterium paraoxydans)發(fā)酵上清液的制備：取副氧化微桿菌(Microbacterium paraoxydans)菌株進(jìn)行活化，將活化后菌株進(jìn)行種子培養(yǎng)；將種子液接種到發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行發(fā)酵，發(fā)酵完成后將發(fā)酵液進(jìn)行離心，取上清液即得。

進(jìn)一步地，所用副氧化微桿菌(Microbacterium paraoxydans)菌株，已于2019年12月10日保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心；保藏單位地址：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號中國科學(xué)院微生物研究所；保藏號：CGMCC No.19121。

進(jìn)一步地，副氧化微桿菌(Microbacterium paraoxydans)所用活化培養(yǎng)基、種子培養(yǎng)基及發(fā)酵培養(yǎng)基分別為LB培養(yǎng)基。

進(jìn)一步地，種子液接種量按0.5％-2％v/v接入到發(fā)酵培養(yǎng)基中。