[發明專利]一種腈水合酶突變體及其應用有效
| 申請號: | 202011450515.3 | 申請日: | 2020-12-09 |
| 公開(公告)號: | CN112501151B | 公開(公告)日: | 2021-11-16 |
| 發明(設計)人: | 周哲敏;江詩進;程中一;劉中美;崔文璟;周麗;韓來闖;郭軍玲 | 申請(專利權)人: | 江南大學 |
| 主分類號: | C12N9/88 | 分類號: | C12N9/88;C12N15/60;C12N15/70;C12N1/21;C12P17/12;C12R1/19 |
| 代理公司: | 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司 23211 | 代理人: | 張勇 |
| 地址: | 214000 江蘇*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 水合 突變體 及其 應用 | ||
1.一種腈水合酶突變體,其特征在于,含有α亞基、β亞基以及調控蛋白;
所述α亞基的氨基酸序列如SEQ ID NO.1;
所述β亞基的氨基酸序列如SEQ ID NO.4或SEQ ID NO.5;
所述調控蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.3。
2.編碼權利要求1所述腈水合酶突變體的基因。
3.含有權利要求2所述基因的重組載體。
4.表達權利要求1所述腈水合酶突變體的微生物細胞。
5.如權利要求4所述的微生物細胞,其特征在于,所述微生物細胞包括大腸桿菌。
6.如權利要求4或5所述的微生物細胞,其特征在于,所述細胞是以大腸桿菌BL21為宿主,以pET系列質粒為載體。
7.如權利要求6所述的微生物細胞,其特征在于,所述質粒為pET-24(+)。
8.一種提高腈水合酶酶活力的方法,其特征在于,是將來源于溫泉熱堿芽孢桿菌(
9.一種生產腈水合酶的方法,其特征在于,將表達權利要求1所述腈水合酶突變體的微生物細胞接種于LB培養基中,37℃培養至OD600為0.6-0.8時,加入誘導劑IPTG于24℃誘導12-16 h。
10.權利要求1所述的腈水合酶突變體或權利要求4所述的微生物細胞在生產含煙酰胺的產品中的應用。
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