[發(fā)明專利]一種鐵皮石斛母瓶苗生產(chǎn)方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011430986.8
• 申請日: 2020-12-09
• 公開（公告）號: CN112544446A
• 公開（公告）日: 2021-03-26
• 發(fā)明（設計）人: 黃偉鵬
• 申請（專利權）人: 浙江坤極生物科技有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 杭州中成專利事務所有限公司 33212
• 代理人: 朱瑩瑩

本發(fā)明公開了一種鐵皮石斛母瓶苗生產(chǎn)方法，包括如下步驟：步驟1)：將鐵皮石斛蒴果消毒及干燥；步驟2)：將鐵皮石斛蒴果內(nèi)的種子接種于1代半固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)；其中所述1代半固體培養(yǎng)基由如下原料制成：以1/2MS培養(yǎng)基作為基本培養(yǎng)基、30g/L蔗糖、0.1g/L肌醇以及1～2g/L瓊脂，pH 5.8～6.0；步驟3)：將步驟2)中的鐵皮石斛種子混懸液轉接并均勻鋪在2代母瓶苗培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)；其中所述2代母瓶苗培養(yǎng)基由如下原料制成：以1/2MS培養(yǎng)基作為基本培養(yǎng)基、0.2mg/L NAA、30g/L蔗糖、0.1g/L肌醇、5g/L瓊脂以及8％～10％香蕉泥，pH6.0～6.2。采用本發(fā)明提供的生產(chǎn)方法，可以提高鐵皮石斛母瓶生產(chǎn)效率，大大降低生產(chǎn)成本。

技術領域

本發(fā)明涉及植物培養(yǎng)技術領域，具體涉及一種鐵皮石斛母瓶苗生產(chǎn)方法。

背景技術

鐵皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)屬蘭科石斛屬草本植物，別名黑節(jié)草。始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，位于九大仙草之首。其味甘，性微寒，具有生津養(yǎng)胃、滋陰清熱、潤肺益腎、明目強腰之功效。現(xiàn)代藥理研究表明鐵皮石斛具有促進唾液分泌、抗胃潰瘍、增強免疫、抗氧化、抗衰老、抗疲勞、抗腫瘤、降血糖、降血壓、降血脂、護肝等等作用，受到越來越多人的重視。鐵皮石斛被國際藥用植物界稱為“藥界大熊貓”。在自然狀態(tài)下，其種子由于發(fā)育不成熟以及對環(huán)境的特定需求，在天然狀態(tài)下其繁殖率一直較低，并且生長緩慢，加上人為過度開采，野生鐵皮石斛更是少之又少。目前用于人工栽培的鐵皮石斛種苗主要通過植物組織培養(yǎng)技術培養(yǎng)獲得，因而優(yōu)化鐵皮石斛組織培養(yǎng)技術是規(guī)模化生產(chǎn)的關鍵。

蘭科植物的種子如塵埃般微小，往往一個蒴果就含有上萬顆細小的種子，絕大多數(shù)蘭科植物的種子需要在其菌的作用才能進行共生萌發(fā)。以鐵皮石斛種子為外植體進行組織培養(yǎng)，可以大大提高繁殖系數(shù)。當前以鐵皮石斛種子為外植體進行組織培養(yǎng)，其主流步驟為種子萌發(fā)-原球莖轉接-母瓶苗培養(yǎng)-母瓶苗轉接培養(yǎng)。具體為將鐵皮石斛種子接種于固體培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，培養(yǎng)一段時間后，將種子萌發(fā)產(chǎn)生的原球莖轉接至母瓶苗培養(yǎng)基進行鐵皮石斛母瓶苗培養(yǎng)，待母瓶培養(yǎng)基中的小苗長大到一定階段后，再轉接至壯苗生根培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)。其中種子萌發(fā)產(chǎn)生的原球莖轉接這一階段，轉接效率低下，人工成本高。

發(fā)明內(nèi)容

針對現(xiàn)有技術中存在的技術問題，本申請?zhí)峁┝艘环N鐵皮石斛母瓶苗生產(chǎn)方法。

一種鐵皮石斛母瓶苗生產(chǎn)方法，包括如下步驟：

步驟1)：將鐵皮石斛蒴果消毒及干燥；

步驟2)：將鐵皮石斛蒴果內(nèi)的種子接種于1代半固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)；其中所述1代半固體培養(yǎng)基由如下原料制成：以1/2MS培養(yǎng)基作為基本培養(yǎng)基、30g/L蔗糖、0.1g/L肌醇以及1～2g/L瓊脂，pH 5.8～6.0；

步驟3)：將步驟2)中的鐵皮石斛種子混懸液轉接并均勻鋪在2代母瓶苗培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)；其中所述2代母瓶苗培養(yǎng)基由如下原料制成：以1/2MS培養(yǎng)基作為基本培養(yǎng)基、0.2mg/L NAA、30g/L蔗糖、0.1g/L肌醇、5g/L瓊脂以及8％～10％香蕉泥，pH6.0～6.2。采用本發(fā)明提供的生產(chǎn)方法，可以提高鐵皮石斛母瓶生產(chǎn)效率，大大降低生產(chǎn)成本。

優(yōu)選的，所述步驟1)的鐵皮石斛蒴果消毒及干燥具體步驟為：取鐵皮蒴果，先用洗衣粉浸泡10-15min，再用自來水沖洗5min，然后用75％乙醇消毒3min，無菌水沖洗3次，0.1％氯化汞溶液消毒25min，然后用無菌水將殘留的升汞沖洗干凈，消毒完畢后置于超凈臺上晾干，裝入無菌紙袋中；將無菌紙袋放入30℃的烘箱中干燥，直至重量沒有變化；將種子袋置于陰涼干燥整潔的環(huán)境中保存，待用。