[發明專利]一種消炎抑菌的醫用補水液及其制備方法

在審

• 申請號: 202011409021.0
• 申請日: 2020-12-03
• 公開（公告）號: CN112472657A
• 公開（公告）日: 2021-03-12
• 發明（設計）人: 何佳男
• 申請（專利權）人: 何佳男
• 主分類號: A61K8/99
• 分類號: A61K8/99;A61K8/9789;A61K8/96;A61K8/60;A61K8/37;A61Q19/00;A61Q17/00;A61Q19/08;A61P29/00;C07C67/31;C07C67/29;C07C69/732;C07H17/065;C07H1/08
• 代理公司: 北京華際知識產權代理有限公司 11676
• 代理人: 袁瑞紅

1.一種消炎抑菌的醫用補水液，其特征在于，包括以下重量份數的原料：10～20份海洋放線菌Y15抑菌物質、5～10份乙醇花色苷、5～10份脂溶性綠原酸、30～50份黑果腺肋花楸果實、30～50份海泥、2～5份防腐劑、1～2份香精、50～100份去離子水。

2.根據權利要求1所述一種消炎抑菌的醫用補水液，其特征在于：所述海洋放線菌Y15抑菌物質為非蛋白和多肽類物質，是海泥分離、篩選后，與芽孢桿菌共同經自制培養基培養得到。

3.根據權利要求2所述的一種消炎抑菌的醫用補水液，其特征在于：所述自制培養基配方為谷氨酸為5.97g/L、K₂HPO₄為1.03g/L、可溶性淀粉為27.67g/L、牛肉膏為18.30g/L、胰蛋白胨為7.50g/L、FeSO₄為0.02g/L、NaCl為0.38g/L。MgSO₄為0.75g/L。

4.根據權利要求1所述的一種消炎抑菌的醫用補水液，其特征在于：所述乙醇花色苷是黑果腺肋花楸果實經過乙醇提取后，再使用超高壓輔助提取法，將提取液進行貯存一定時間得到的。

5.根據權利要求1所述的一種消炎抑菌的醫用補水液，其特征在于：所述脂溶性綠原酸為長鏈脂肪酰氯對綠原酸進行分子修飾制得。

6.一種消炎抑菌的醫用補水液的制備方法，其特征在于，包括以下具體步驟：

(1)取25g海泥加入225mL林格氏液中，無菌均質5min(10次/s)，55℃水浴6min，梯度稀釋至10^-5，各梯度取100μL涂布于分離培養基(倒平板前加入均通過0.22μm膜過濾除菌的終濃度為50mg/L的重鉻酸鉀和25mg/L的萘啶酮酸溶液)，28℃培養7d。待平板長出菌落，挑取具有放線菌典型形態的菌落至純化培養基，純化3次，得到海泥中海洋放線菌；

(2)用指示菌、瓊脂塊法進行初步篩選，將具有透明圈的菌株進行下一步復篩；

(3)將初篩具有抑菌活性的菌株均接種至種子液培養基，通過指示菌、打孔擴散法進行復篩，復篩過程中用光學顯微鏡進行觀察，分離出在培養基上呈圓形，灰白色，不透明，基內菌絲發達，無色素產生的簇狀放線菌為海洋放線菌Y15；

(4)配置自制培養基后與芽孢桿菌共同進行發酵，以5％的接種量接種海洋放線菌Y15進行發酵培養，培養時間為168h，離心、濃縮得到海洋放線菌Y15抑菌物質；

(5)常溫下將黑果腺肋花楸果實加入過量40％的乙醇，伴隨攪拌進行花色苷第一次提取，經乙醇提取后黑果腺肋花楸果實渣，再次加入60％的乙醇溶液，進行第二次超高壓輔助提取，將兩次提取液進行混合，進行25℃下7d的貯藏得到乙醇花色苷；

(6)將適量綠原酸溶于N,N-二甲基甲酰胺，加入催化劑三乙胺，在保溫振蕩的條件下于4h內分批緩慢滴加完一定量的脂肪酰氯，繼續保溫進行綠原酸的分子修飾，將反應混合物過濾，靜置分層，取上層液，用乙醚進行反復多次萃取，合并乙醚層，用飽和食鹽水水洗至中性；經無水硫酸鈉干燥后減壓濃縮蒸出乙醚得粗產物；將粗產品溶于一定量的甲醇溶液，通過薄層色譜法分離純化，制得脂溶性綠原酸；

(7)將海洋放線菌Y15抑菌物質、乙醇花色苷、脂溶性綠原酸加入到去離子水中，加入防腐劑和香精，制得成品。

7.根據權利要求6所述的一種消炎抑菌的醫用補水液的制備方法，其特征在于，上述步驟(4)中：自制培養基為谷氨酸5.97g/L、K₂HPO₄為1.03g/L、可溶性淀粉為27.67g/L、牛肉膏為18.30g/L、胰蛋白胨為7.50g/L、FeSO₄為0.02g/L、NaCl為0.38g/L。MgSO₄為0.75g/L。