[發明專利]一種綠海龜抗菌肽的改造體抗菌肽C-CM5及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 202011372605.5
• 申請日: 2020-11-30
• 公開（公告）號: CN112625108A
• 公開（公告）日: 2021-04-09
• 發明（設計）人: 孫碧昌;王義鵬;于海寧;歐陽建紅
• 申請（專利權）人: 宜肌坊（廈門）生物科技有限公司
• 主分類號: C07K14/46
• 分類號: C07K14/46;A61K38/17;A61K8/64;A61P31/04;A61P31/10;A61P29/00;A23K20/195;A23K20/147;A01N47/44;A01P1/00;A01P3/00
• 代理公司: 廈門律嘉知識產權代理事務所(普通合伙) 35225
• 代理人: 鄭云超;溫潔

本發明提供一種綠海龜抗菌肽的改造體抗菌肽C?CM5及其制備方法和應用，其中，所述改造體抗菌肽的N端為α螺旋，C端為無規則結構的多肽，含有23個氨基酸殘基，分子量2915.45Da，等電點12.78。本發明提供是改造體抗菌肽C?CM5具有廣譜高效的抗菌活性和極強的抗炎活性，此外具有分子量小、結構簡單、溶血活性低、制備方法簡單等有益特點，有望成為一種新型的高效的抗菌藥物，具有廣闊的開發應用前景，尤其是用于制備抗菌藥物或組合物、抑制細菌生長藥物或組合物、抗炎藥物或組合物、防腐劑、動物飼料添加劑或化妝品添加劑中。

技術領域

本發明屬于生物醫學技術領域，具體涉及一種綠海龜(Chelonia mydas)抗菌肽Cm-CATH2的改造體抗菌肽C-CM5及其制備方法和應用。

背景技術

近年來傳統抗生素的大規模濫用導致越來越嚴重的病原微生物耐藥問題，給人類健康帶來巨大的威脅。臨床上應對耐藥微生物感染的措施是使用對耐藥微生物尚未使用過的新的或者替代性的抗生素，因此這就需要持續開發新的抗微生物藥物。

抗菌肽是生物體基因編碼的一種天然小分子多肽，是生物體免疫系統的一種重要分子，對細菌、真菌、病毒甚至原蟲均具有直接的殺滅作用?？咕木哂蟹肿恿啃?、結構簡單、抗菌活性強、殺菌機制獨特、毒性低和不易引起耐藥性等優點，因此自發現之日起就被認為是具有極大開發潛力的新一代抗生素。到目前為止，已從不同生物體中發現超過2600多種不同的抗菌肽，而且其數目還在增加。

發明內容

本發明的目的是為了解決傳統抗生素濫用導致越來越嚴重的病原微生物耐藥的問題，提供一種綠海龜(Chelonia mydas)抗菌肽Cm-CATH2的改造體抗菌肽C-CM5及其制備方法和應用。

第一方面，一種綠海龜抗菌肽Cm-CATH2的改造體抗菌肽C-CM5，其N端為α螺旋，C端為無規則結構的多肽，含有23個氨基酸殘基，分子量2915.45Da，等電點12.78。

所述改造體抗菌肽的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO：1所示Arg Arg Ser ArgPhe Gly Arg Phe Phe Lys Lys Val Arg Lys1Gln Leu Gly Arg Val Lys Arg His Ser。

第二方面，提供綠海龜抗菌肽Cm-CATH2的改造體抗菌肽C-CM5的制備方法：根據綠海龜抗菌肽Cm-CATH2的氨基酸序列，利用分子改造方法設計獲得了改造體C-CM5的氨基酸序列，并利用多肽固相合成的方法對其進行了化學合成。

具體為：根據所述改造體C-CM5的氨基酸序列，用自動多肽合成儀合成其全序列，利用HPLC反相柱層析脫鹽。

其分子量測定采用基質輔助激光解析電離飛行時間質譜(MALDI-TOF)。

純化的C-CM5用高效液相色譜HPLC方法鑒定其純度，分子量測定采用基質輔助激光解析電離飛行時間質譜(MALDI-TOF)，等電聚焦電泳測定等電點，用自動氨基酸測序儀測定氨基酸序列結構。

第三方面，提供綠海龜抗菌肽Cm-CATH2的改造體抗菌肽C-CM5的應用，用于制備抗菌藥物或組合物、抑制細菌生長藥物或組合物、抗炎藥物或組合物、防腐劑、動物飼料添加劑或化妝品添加劑中。

本發明的有益效果在于：

1、本發明根據綠海龜抗菌肽的氨基酸序列，利用分子改造方法設計改造體C-CM5，該改造體具有廣譜高效的抗菌活性和極強的抗炎活性，此外具有分子量小、結構簡單、溶血活性低、制備方法簡單等有益特點，有望成為一種新型的高效的抗菌藥物，具有廣闊的開發應用前景；

2、與抗菌肽Cm-CATH2相比，氨基酸殘基數量相對較少，易于合成，且合成成本降低。

附圖說明