[發明專利]破壁劑組合物及其制備方法和在卵囊的應用

有效

• 申請號: 202011362052.5
• 申請日: 2020-11-27
• 公開（公告）號: CN112400865B
• 公開（公告）日: 2022-05-03
• 發明（設計）人: 王健君;趙立山;呂健勇
• 申請（專利權）人: 松山湖材料實驗室
• 主分類號: A01N1/02
• 分類號: A01N1/02
• 代理公司: 深圳市千納專利代理有限公司 44218
• 代理人: 陳培瓊

1.一種破壁劑組合物，其特征在于，其包括以下質量百分含量的組份：乙醇10％～40％、溶菌酶0.01％～0.4％、聚乙二醇0.1％～8％、檸檬酸鉀0.1％～6％、果糖0.5％～10％、麥芽糖0.5％～5％、氯胺T 0.5％～7％、磷酸二氫鈉0.1％～0.8％、磷酸氫二鈉0.2％～1％、標準PBS緩沖液2％～5％，其余為注射用水。

2.根據權利要求1所述的破壁劑組合物，其特征在于：所述聚乙二醇為聚乙二醇200。

3.一種破壁劑組合物的制備方法，其特征在于：其包括以下步驟：

(1)預備以下質量百分含量的組份：乙醇10％～40％、溶菌酶0.01％～0.4％、聚乙二醇0.1％～8％、檸檬酸鉀0.1％～6％、果糖0.5％～10％、麥芽糖0.5％～5％、氯胺T 0.5％～7％、磷酸二氫鈉0.1％～0.8％、磷酸氫二鈉0.2％～1％、標準PBS緩沖液2％～5％，其余為注射用水；

(2)往所述注射用水中加溶菌酶、聚乙二醇200和檸檬酸鉀，攪拌溶解后，獲得第一混合物；

(3)往所述第一混合物加入果糖、麥芽糖和氯胺T，攪拌溶解后，獲得第二混合物；

(4)往所述第二混合物加入乙醇，攪拌溶解后，獲得第三混合物；

(5)往所述第三混合物加入標準PBS緩沖液、磷酸二氫鈉和磷酸氫二鈉，調節pH至6.8～7.4。

4.根據權利要求3所述的破壁劑組合物，其特征在于：所述聚乙二醇為聚乙二醇200。

5.根據權利要求3所述的破壁劑組合物，其特征在于：所述步驟(3)中的果糖、麥芽糖和氯胺T按由前至后的順序依次加入。

6.一種權利要求1-2或3-5任意一項所述的破壁劑組合物在卵囊的應用。

7.根據權利要求6所述的破壁劑組合物在卵囊的應用，其特征在于，應用步驟如下：

(S1)獲取純化處理后的卵囊液，然后加入權利要求1-2或3-5中任意一項所述的破壁劑組合物，通過攪拌或渦旋混合，然后靜置；

(S2)取靜置不同時間段的卵囊懸浮液置于顯微鏡下，觀察卵囊形態變化并與空白組對照分析滲透情況。

8.根據權利要求7所述的破壁劑組合物在卵囊的應用，其特征在于，所述步驟(S1)中的純化步驟如下：

(Ⅰ)取卵囊液，進行離心、沉淀；

(Ⅱ)除去上清液，加入飽和鹽水重懸沉淀，離心；

(Ⅲ)將含有卵囊液的上層液體移入裝有注射水的離心管，再次離心，獲得卵囊沉淀液；

(Ⅳ)將卵囊沉淀液移入裝有注射水的離心管，重復上一步驟幾次，最后獲得不含有消毒液成分的卵囊液。

9.根據權利要求8所述的破壁劑組合物在卵囊的應用，其特征在于，在所述步驟(Ⅳ)中重復的步驟為三次。