[發明專利]澳洲堅果過敏原Vicilin特異性納米抗體及其應用

有效

• 申請號: 202011313101.6
• 申請日: 2020-11-20
• 公開（公告）號: CN112321709B
• 公開（公告）日: 2022-09-20
• 發明（設計）人: 王碩;胡耀中;吳思浩
• 申請（專利權）人: 南開大學
• 主分類號: C07K16/16
• 分類號: C07K16/16;G01N33/68;G01N33/53
• 代理公司: 天津合正知識產權代理有限公司 12229
• 代理人: 邢月;張艷梅

本發明提供了一種澳洲堅果過敏原Vicilin特異性納米抗體及其應用，所述的特異性納米抗體為納米抗體Nb58、納米抗體Nb68、納米抗體Nb81、納米抗體Nb135、納米抗體Nb139或納米抗體Nb181中的至少一種。本發明所述的一種澳洲堅果過敏原Vicilin特異性納米抗體制備周期短，成本低，穩定性高，可用于免疫檢測體系的構建。

技術領域

本發明屬于免疫檢測領域，尤其是涉及一種澳洲堅果過敏原Vicilin特異性納米抗體及其應用。

背景技術

傳統食物過敏原組分的免疫檢測技術開發基于單克隆或多克隆抗體的篩選與制備，其要求在動物免疫過程中注射高純度過敏原蛋白，并且篩選和制備抗體周期較長。在駝源動物外周血液中天然存在一種重鏈抗體(Heavy Chain only Antibodies,HCAbs)，與傳統單克隆抗體相比，重鏈抗體天然缺失輕鏈及重鏈第一恒定區(CH1)。克隆并表達重鏈抗體的重鏈可變區得到重鏈抗體的抗原識別和結合域，稱為納米抗體(Nanobody,Nb)。納米抗體具有與原重鏈抗體相當的結構穩定性及抗原結合活性，是目前已知的可結合靶向抗原的最小抗體單位。傳統免疫過程需要制備高純度過敏原蛋白，并且傳統單克隆抗體制備周期長，成本高，與傳統單克隆抗體片段相比，納米抗體存在諸多優勢。納米抗體可溶性極高，不易發生聚集沉淀，具有很高的穩定性，能夠在高溫、強酸、強堿等致變性條件下保持抗原結合活性，適合于原核及真核表達系統。目前，納米抗體被廣泛應用于開發治療性抗體藥物、診斷試劑(膠體金法、酶聯免疫吸附法、電化學發光法)、親和純化基質、免疫學研究等基礎科學研究領域。

發明內容

有鑒于此，本發明旨在克服現有技術中的缺陷，提出一種澳洲堅果過敏原Vicilin特異性納米抗體及其應用。

為達到上述目的，本發明的技術方案是這樣實現的：

一種澳洲堅果過敏原Vicilin特異性納米抗體，所述的特異性納米抗體為納米抗體Nb58、納米抗體Nb68、納米抗體Nb81、納米抗體Nb135、納米抗體Nb139或納米抗體Nb181中的至少一種。

進一步，所述的特異性納米抗體包括4個框架區FR1、FR2、FR3、FR4和3個互補決定區CDR1、CDR2、CDR3；

對于納米抗體Nb58：FR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述的FR2的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述的FR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示，所述的FR4的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示，所述的CDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示，所述的CDR2的氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示，所述的CDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.7所示；

對于納米抗體Nb68：FR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.8所示，所述的FR2的氨基酸序列如SEQ ID NO.9所示，所述的FR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.10所示，所述的FR4的氨基酸序列如SEQ ID NO.11所示，所述的CDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.12所示，所述的CDR2的氨基酸序列如SEQ ID NO.13所示，所述的CDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.14所示；

對于納米抗體Nb81：FR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.15所示，所述的FR2的氨基酸序列如SEQ ID NO.16所示，所述的FR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.17所示，所述的FR4的氨基酸序列如SEQ ID NO.18所示，所述的CDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.19所示，所述的CDR2的氨基酸序列如SEQ ID NO.20所示，所述的CDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.21所示；