[發明專利]一種從Nigella sativa種籽中分離提取糖及糖類衍生物的方法

有效

• 申請號: 202011304961.3
• 申請日: 2020-11-20
• 公開（公告）號: CN112390833B
• 公開（公告）日: 2023-05-16
• 發明（設計）人: 劉振花;康文藝;張巖;馬常陽;牛云;屈嬌嬌;王貴生;王莉
• 申請（專利權）人: 河南大學
• 主分類號: C07H1/08
• 分類號: C07H1/08;C07H15/04;C07H3/02;C13K1/00
• 代理公司: 鄭州聯科專利事務所(普通合伙) 41104
• 代理人: 楊海霞

1.一種從Nigella?sativa種籽中分離提取糖及糖類衍生物的方法，其特征在于，包括以下步驟：

1）以干燥的Nigella?sativa種籽為原料，粉碎后用石油醚脫脂，殘渣揮干石油醚，用60-80%乙醇提取，提取液減壓回收溶劑，得到提取物浸膏；

2）將提取物浸膏用甲醇溶解，拌樣于硅膠柱，用體積比為20:1、15:1、10:1、5:1、3:1、1:1的二氯甲烷-甲醇對硅膠柱進行梯度洗脫，硅膠薄層色譜檢測合并，得到7個組分，按照所得組分極性由小到大依次標記為Fr1-Fr7；

3）第3個組分Fr3經反相柱色譜分離，以體積比為40:60、50:50、60:40、70:30、80:20、90:10、100:0的甲醇-水溶液梯度洗脫，硅膠薄層色譜檢測合并，得到8個組分，按照所得組分極性由小到大依次標記為3-1~3-8；

4）組分3-1經硅膠柱色譜分離，以體積比為10:1、8:1、5:1、3:1、1:1的乙酸乙酯-甲醇進行梯度洗脫，硅膠薄層色譜檢測合并，得到2個組分，按照所得組分極性由小到大依次標記為3-1-1和3-1-2；

5）組分3-1-2經Sephadex?LH-20葡聚糖凝膠柱色譜，以體積比1:1的二氯甲烷-甲醇洗脫，再經硅膠柱色譜分離，以體積比為8:1、5:1、3:1、1:1的乙酸乙酯-甲醇梯度洗脫，硅膠薄層色譜檢測合并，得到2個亞組分，按照所得組分極性由小到大依次標記為3-1-2a和3-1-2b，組分3-1-2a為α-D-呋喃果糖粗品；組分3-1-2b經反相柱色譜分離，以體積比15:85的甲醇-水等度洗脫，得到乙基-β-D-呋喃果糖粗品；

組分3-1-1經Sephadex?LH-20葡聚糖凝膠柱色譜分離，以體積比1:1的二氯甲烷-甲醇洗脫，再經反相柱色譜分離，以體積比為15:85、20:80、30:70、60:40、90:10的甲醇-水溶液梯度洗脫，得到乙基-α-D-吡喃半乳糖粗品；

步驟5）所得α-D-呋喃果糖粗品用甲醇溶解，經Sephadex?LH-20凝膠柱色譜分離，以甲醇洗脫，得α-D-呋喃果糖純品；

步驟5）所得乙基-α-D-吡喃半乳糖粗品用甲醇溶解拌樣于硅膠，再經硅膠柱色譜分離，以體積比為8:1、5:1、3:1、1:1的乙酸乙酯-甲醇進行梯度洗脫，得乙基-α-D-吡喃半乳糖純品；

步驟5）所得乙基-β-D-呋喃果糖粗品用甲醇溶解，經Sephadex?LH-20凝膠柱色譜分離，以甲醇洗脫，得乙基-β-D-呋喃果糖純品。

2.如權利要求1所述從Nigella?sativa種籽中分離提取糖及糖的衍生物類化合物的方法，其特征在于，步驟1）中，石油醚脫脂2-4次，每次脫脂時間為2-4天，干燥Nigella?sativa種籽與石油醚的料液添加比為5kg：6-10L。

3.如權利要求1所述從Nigella?sativa種籽中分離提取糖及糖的衍生物類化合物的方法，其特征在于，步驟1）中，用70%乙醇冷浸提取3次，每次3天；殘渣與70%乙醇的料液添加比為5kg：6-10L。