[發(fā)明專利]一種碳[13

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011301502.X
• 申請日: 2020-11-19
• 公開（公告）號: CN112461967B
• 公開（公告）日: 2022-12-02
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 龔愛華;馬勝利;申紅紅;曹玲;李尚偉;夏秋萍
• 申請（專利權(quán)）人: 江蘇華亙泰來生物科技有限公司;北京華亙安邦科技有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/32;G01N30/54
• 代理公司: 北京集佳知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11227
• 代理人: 藏斌

本發(fā)明屬于化學(xué)分析領(lǐng)域，尤其涉及一種碳[¹³C]?尿素中三聚氰胺和三聚氰酸的檢測方法，該方法包括以下步驟：a)將碳[¹³C]?尿素樣品與稀釋劑混合，得到供試品溶液；稀釋劑為磷酸鹽緩沖溶液；b)對供試品溶液進(jìn)行液相色譜檢測，得到供試品溶液的色譜圖；色譜檢測的過程中，所采用的色譜柱中的填充劑為親水型硅氧烷鍵合硅膠，所采用的流動相為磷酸鹽緩沖溶液和甲醇；所采用的洗脫方式為梯度洗脫；c)根據(jù)色譜圖中三聚氰胺和三聚氰酸所對應(yīng)的特征峰的出峰情況，得到樣品中三聚氰胺和三聚氰酸的檢測結(jié)果。本發(fā)明提供的方法適用于碳[¹³C]?尿素制品中三聚氰胺和三聚氰酸的定性和定量檢測分析，準(zhǔn)確性高，重復(fù)性好。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于化學(xué)分析領(lǐng)域，尤其涉及一種碳[¹³C]-尿素中三聚氰胺和三聚氰酸的檢測方法。

背景技術(shù)

碳[¹³C]-尿素，應(yīng)用于制備碳[¹³C]-尿素呼氣試驗診斷試劑盒，該試劑盒用來診斷人體是否感染胃幽門螺桿菌，此檢測手段是國際公認(rèn)的診斷胃幽門螺桿菌感染的“金標(biāo)準(zhǔn)”。碳[¹³C]-尿素是以¹³CO為原料，通過化學(xué)合成法制備，后經(jīng)蒸餾、精制除雜獲得。三聚氰胺和三聚氰酸是碳[¹³C]-尿素的生產(chǎn)過程中產(chǎn)生的副產(chǎn)物，為了確保碳[¹³C]-尿素的制品品質(zhì)滿足使用要求，檢測制品中是否殘留有三聚氰胺和三聚氰酸是十分必要的。

目前，關(guān)于三聚氰胺和三聚氰酸的色譜檢測主要集中于牛奶、血漿和結(jié)石中，由于待測體系成分上的差異，直接套用上述現(xiàn)有方法檢測碳[¹³C]-尿素中三聚氰胺和三聚氰酸的準(zhǔn)確性較差，且易造成色譜柱壽命的縮短。因此，開發(fā)一種針對碳[¹³C]-尿素中三聚氰胺和三聚氰酸的專用檢測方法，是十分必要的。

發(fā)明內(nèi)容

有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提供一種碳[¹³C]-尿素中三聚氰胺和三聚氰酸的檢測方法，該方法適用于碳[¹³C]-尿素制品中三聚氰胺和三聚氰酸的定性和定量檢測分析，準(zhǔn)確性高，重復(fù)性好。

本發(fā)明提供了一種碳[¹³C]-尿素中三聚氰胺和三聚氰酸的檢測方法，包括以下步驟：

a)將待測碳[¹³C]-尿素樣品與稀釋劑混合，得到供試品溶液；所述稀釋劑為磷酸鹽緩沖溶液；

b)將所述供試品溶液注入液相色譜儀中進(jìn)行色譜檢測，得到供試品溶液的色譜圖；

所述色譜檢測的過程中，所采用的色譜柱為親水性色譜柱，所述色譜柱中的填充劑為親水型硅氧烷鍵合硅膠；

所述色譜檢測的過程中，所采用的流動相為磷酸鹽緩沖溶液和甲醇；所采用的洗脫方式為梯度洗脫，所述梯度洗脫的洗脫程序設(shè)置為：0～2min，磷酸鹽緩沖溶液和甲醇的體積比為100:0；2～3min，磷酸鹽緩沖溶液和甲醇的體積比由100:0逐漸變化調(diào)整至80:20；3～16min，磷酸鹽緩沖溶液和甲醇的體積比為80:20；16～17min，磷酸鹽緩沖溶液和甲醇的體積比由80:20逐漸變化調(diào)整至100:0；17～25min，磷酸鹽緩沖溶液和甲醇的體積比為100:0；

c)根據(jù)所述色譜圖中三聚氰胺和三聚氰酸所對應(yīng)的特征峰的出峰情況，得到碳[¹³C]-尿素樣品中三聚氰胺和三聚氰酸的檢測結(jié)果。

優(yōu)選的，步驟a)和步驟b)中，所述磷酸鹽緩沖溶液為磷酸二氫鉀-磷酸氫二鉀緩沖液；

所述磷酸二氫鉀-磷酸氫二鉀緩沖液中的磷酸二氫鉀濃度為10mmol/L，所述磷酸二氫鉀-磷酸氫二鉀緩沖液的pH值為7～9。

優(yōu)選的，所述磷酸二氫鉀-磷酸氫二鉀緩沖液的pH值為7.5。