[發明專利]一種牛骨小分子活性肽的生物制備方法

在審

• 申請號: 202011273130.4
• 申請日: 2020-11-13
• 公開（公告）號: CN113136408A
• 公開（公告）日: 2021-07-20
• 發明（設計）人: 汪超;劉雅頎;尹曉清
• 申請（專利權）人: 湖北工業大學
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K1/34;A23L33/18
• 代理公司: 武漢宇晨專利事務所(普通合伙) 42001
• 代理人: 余曉雪

本發明涉及食品加工領域，具體公開了一種牛骨小分子活性肽的生物制備方法，本發明是以牛軟骨、整粒糯米酒糟、完整鮮茉莉花和果葡糖漿為原料經前期原料處理、混合、蜜蜂生物轉化、分離干燥而制成的牛骨小分子活性肽。本發明所得的牛骨小分子活性肽干基純度＞91%，其中189?1000道爾頓的牛骨小分子活性肽占總肽段質量分數的69%以上，能作為大眾人群的一種功能膳食補充劑，尤其對于運動少的群體有明顯的強精壯骨的功效。

技術領域

本發明涉及食品加工領域，具體涉及一種牛骨小分子活性肽的生物制備方法。

背景技術

目前小分子肽的制備通常使用的手段是使用酸解或酶解的方式將蛋白質水解獲得小分子肽，制備方法大多集中在酸水解和酶水解結合以獲得得率較高的肽含量，進一步通過酶切位點的精準控制以獲得有活性的肽類物質，而使用蜜蜂這類昆蟲作為工具實現蛋白質的降解和生物轉化是尚未見報道的。蜜蜂不僅能降解標的蛋白質，而且還能完成部分小分子肽、酶的重構，從而實現小分子肽、酶的生成、合成及生物轉化。

發明內容

針對上述現有技術的不足，本發明的主要目的在于，提供一種牛骨小分子活性肽的生物制備方法，具體步驟如下：

(1)將新鮮的牛軟骨洗凈，加水沒過牛軟骨，煮沸后除去浮渣和殘油，撈出牛軟骨，冷卻后重復上述加水、煮沸、除浮渣和殘油、撈出牛軟骨的步驟至少三次；牛軟骨瀝干后，置于-10℃～-5℃進行緩慢冷凍，冷凍完全后再進行解凍處理，如此冷凍解凍至少三次后，收集牛軟骨和牛軟骨解凍液；

(2)取步驟(1)收集的牛軟骨，按牛軟骨：水＝200～250：800～1200的質量比加水混合，用錘片式粉碎機(型號：CSM-H系列機械粉碎機)高速剪切打漿，膠體磨(型號：JMF-280)磨漿，高壓均質機(型號：GYB60-6S)剪切后，得到牛軟骨混漿；

然后按牛軟骨混漿：完整鮮茉莉花：整粒糯米酒糟＝10～12：0.6～1：0.4～0.8的質量比加入完整鮮茉莉花、整粒糯米酒糟混合，再向其中加入步驟(1)收集的牛軟骨解凍液，文火常壓煮沸后保持40～60min(去除牛軟骨的腥雜味，使牛軟骨混漿具有濃郁的茉莉花香，同時避免將茉莉花和整粒糯米酒糟煮爛而保持完整形態)，撈出完整茉莉花和整粒糯米酒糟后，得到牛軟骨液；

將牛軟骨液抽真空密封包裝，再經132～140℃、0.22～0.25MPa高溫加壓條件下作用1.5～2.5小時，完成牛軟骨的解聚；

(3)將步驟(2)所得解聚后的牛軟骨液拆包，用60目濾布過濾去除不溶性物質，收集牛骨濾液；按牛骨濾液：果葡糖漿＝60～65：35～40的質量比加入果葡糖漿混合均勻得骨糖液，骨糖液經真空低溫(真空度：-0.08～-0.10MPa，溫度控制在50～58℃)濃縮至原體積的1/3～1/2，得骨糖膏；

(4)將干絲瓜瓤固定在蜂箱底部，再將步驟(3)所得骨糖膏分散滴落于絲瓜瓤上使其不聚集成塊，便于蜜蜂采食；待骨糖膏被蜜蜂采食完后收集蜂糖蜜(本發明中：蜂糖蜜是人工喂食蜜蜂由果葡糖漿制備而成的骨糖膏而產生；蜂蜜是蜜蜂采食花蕊而產生)；將蜂糖蜜加水(優選加2～5倍體積水)稀釋，用200目濾布過濾去除不溶性物質，再經濾膜(例如：納濾膜及超濾膜)分離去除包括果糖和葡萄糖在內的小分子，其主要截留分子量在189～1000道爾頓的牛骨小分子活性肽；

(5)步驟(4)所得截留物經速凍、真空冷凍干燥，即得牛骨小分子活性肽。

進一步，步驟(1)所述新鮮的牛軟骨是以牦牛為原料生產的。

進一步，步驟(2)所述整粒糯米酒糟為湖北孝感地區用糯米制備的甜米酒新鮮壓干的整粒糯米酒糟，干基質量百分比高于50％。

進一步，步驟(3)所述果葡糖漿為F42型。

進一步，步驟(3)和步驟(4)所用濾布為尼龍濾布。