[發明專利]一種檢測甲草胺的試紙條及其應用

有效

• 申請號: 202011266446.0
• 申請日: 2020-11-13
• 公開（公告）號: CN112462070B
• 公開（公告）日: 2023-07-11
• 發明（設計）人: 王兆芹;馬玉華;賈芳芳;王琳琛;萬宇平;何方洋
• 申請（專利權）人: 北京望爾生物技術有限公司;北京勤邦科技股份有限公司
• 主分類號: G01N33/58
• 分類號: G01N33/58;G01N33/577;G01N33/558;G01N33/53
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1.一種檢測甲草胺的試紙條，包括樣品吸收墊(1)、結合物釋放墊(2)、反應膜(3)、吸水墊(4)和底板(7)，其特征在于所述反應膜上具有包被有甲草胺半抗原-載體蛋白偶聯物的檢測線(5)和包被有羊抗鼠抗抗體的質控線(6)，所述結合物釋放墊(2)噴涂有甲草胺單克隆抗體-膠體金標記物，所述甲草胺半抗原-載體蛋白偶聯物由甲草胺半抗原與載體蛋白偶聯得到，所述載體蛋白為牛血清白蛋白、卵清蛋白、血藍蛋白、甲狀腺蛋白、人血清白蛋白，所述甲草胺半抗原的制備方法如下：

取化合物a?2.07g，加乙腈100ml溶解，加無水碳酸鉀1.38g，充分攪拌，加無水碘化鈉0.27g，加氯甲基甲基醚0.81g，充分攪拌后，60℃反應2h，停止反應，旋蒸除去乙腈，加水180ml，加乙酸乙酯200ml萃取，靜置，分去水相，旋蒸蒸干，得到黃色油狀物，加體積比為5:1的正己烷/乙酸乙酯70ml重結晶，得到化合物c?2.4g，收率95.62％；取化合物c?2.4g，加二氯甲烷100ml溶解，加PDC?3.76g，攪拌混勻，加冰乙酸1.5ml，室溫攪拌4h，停止反應，抽濾，除去不溶物，濾液加水100ml充分震蕩，靜置，分去水相，濃縮蒸干，得到紅色油狀物，上硅膠柱，體積比為3:1的石油醚/乙酸乙酯洗脫分離，得到化合物d?1.9g，收率85.2％；取化合物d1.9g，加1，2-二氯乙烷70ml溶解，加3.5ml三乙胺，加一氯代乙酰氯0.95g，室溫攪拌4h，停止反應，加水100ml充分震蕩，靜置，分去水相有機相蒸干，上硅膠柱，體積比為10:1的二氯甲烷/甲醇洗脫分離，得到化合物e丙醛-甲草胺1.45g，收率54.88％，即為半抗原產物；

所述甲草胺半抗原的制備圖如下：

2.如權利要求1所述的試紙條，其特征在于所述樣品吸收墊(1)、結合物釋放墊(2)、反應膜(3)、吸水墊(4)依次粘貼在底板(7)上。

3.如權利要求1所述的試紙條，其特征在于所述結合物釋放墊1/3～1/2被覆蓋于樣品吸收墊下。

4.如權利要求1所述的試紙條，其特征在于所述甲草胺單克隆抗體是以甲草胺半抗原-載體蛋白偶聯物作為免疫原制備獲得，所述羊抗鼠抗抗體是將鼠源抗體免疫羊得到。

5.一種制備權利要求1-4任一項所述試紙條的方法，其包括步驟：

1)制備噴涂有甲草胺單克隆抗體-膠體金標記物的結合物釋放墊；

2)制備具有包被有甲草胺半抗原-載體蛋白偶聯物的檢測線和包被有羊抗鼠抗抗體的質控線的反應膜；

3)將1)和2)制備好的結合物釋放墊、反應膜與樣品吸收墊、吸水墊和底板組裝成試紙條。

6.一種檢測農作物中甲草胺殘留的方法，其包括步驟：

1)用權利要求1-4任一項所述的試紙條進行檢測；

2)分析檢測結果。