[發(fā)明專利]一種利用雞CEBPζ基因鑒定雞腹部脂肪量的方法及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011263016.3
• 申請(qǐng)日: 2020-11-12
• 公開（公告）號(hào): CN112375811B
• 公開（公告）日: 2021-06-15
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王守志;李紫薇;李玉冬;劉鑫;王偉佳;李輝;王寧;郭懷順;肖凡;高海河
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): C12Q1/6858
• 分類號(hào): C12Q1/6858;C12Q1/6888
• 代理公司: 哈爾濱市陽(yáng)光惠遠(yuǎn)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 23211
• 代理人: 王志新

1.一種利用肉雞CEBPζ基因鑒定肉雞腹部脂肪量的方法，其特征在于，所述方法的具體步驟如下：

1）根據(jù)肉雞CEBPζ基因SNP位點(diǎn)g.764TG上游123bp和下游302bp序列設(shè)計(jì)引物，獲得擴(kuò)增引物；所述擴(kuò)增引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1-SEQ ID NO.2所示；

2）利用步驟1）所得的擴(kuò)增引物進(jìn)行肉雞基因組DNA的PCR擴(kuò)增，獲得擴(kuò)增產(chǎn)物；

3）利用限制性內(nèi)切酶Pvu II對(duì)步驟2）所得的擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行酶切，獲得酶切產(chǎn)物；

4）對(duì)步驟3）所得的酶切產(chǎn)物進(jìn)行電泳分離，獲得分離產(chǎn)物；

5）對(duì)步驟4）所得的分離產(chǎn)物進(jìn)行基因型分析，獲得肉雞腹部脂肪量的標(biāo)記基因型；所述腹部脂肪量以腹脂重和腹脂率進(jìn)行計(jì)量；所述肉雞腹部脂肪量的標(biāo)記基因型，當(dāng)肉雞CEBPζ基因位點(diǎn)g.764TG為T堿基時(shí)，酶切產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳條帶大小為426bp，將其命名為TT基因型；當(dāng)肉雞CEBPζ基因位點(diǎn)g.764TG為G堿基時(shí)，酶切產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳條帶為兩條帶，大小為300bp和126bp，將其命名為GG基因型；該位點(diǎn)雜合的個(gè)體酶切產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳條帶為三條，大小分別為426bp、300bp、126bp，將其命名為GT基因型；降低肉雞腹部脂肪含量的有利基因型為TT基因型。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟4）所述電泳分離采用瓊脂糖凝膠，所述瓊脂糖凝膠的質(zhì)量濃度為2%。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟5）所述基因型分析通過(guò)限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性聚合酶鏈反應(yīng)方法，對(duì)擴(kuò)增結(jié)果進(jìn)行分析。

4.權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng)所述方法在肉雞腹部脂肪量相關(guān)的遺傳育種中的應(yīng)用，其特征在于，所述肉雞腹部脂肪量為腹脂重和腹脂率。