[發明專利]免疫狀態評估方法及應用

有效

• 申請號: 202011262746.1
• 申請日: 2020-11-12
• 公開（公告）號: CN112331344B
• 公開（公告）日: 2021-08-03
• 發明（設計）人: 林莉婭;王謝
• 申請（專利權）人: 深圳泛因醫學有限公司
• 主分類號: G16H50/30
• 分類號: G16H50/30;G16B20/00
• 代理公司: 廣州新諾專利商標事務所有限公司 44100
• 代理人: 李海恬;劉杉

本發明涉及一種免疫狀態評估方法及應用，屬于免疫評價技術領域。該方法包括：免疫組庫分析：提取待評估目標樣本基因組，構建免疫組庫文庫；進行高通量測序，分析TCR和/或BCR的克隆多樣性，獲得免疫組庫指標值；免疫功能分析：取待評估目標血液樣本，分為對照和刺激樣本，取刺激樣本加入刺激物，使刺激樣本中免疫細胞產生免疫應答反應，檢測免疫組分在刺激前后表達差異，分析得到免疫功能得分；數據分析：綜合免疫組庫分析結果和免疫功能分析結果，獲得免疫年齡，根據免疫年齡、免疫功能得分和免疫組庫指標值中的至少一種，獲得待評估目標的免疫狀態。該方法結合高通量免疫組庫測序技術和免疫功能檢測兩種方法，從不同層面全面綜合評估免疫狀態。

技術領域

本發明涉及免疫評價技術領域，特別是涉及一種免疫狀態評估方法及應用。

背景技術

人類無時無刻無處不處于微生物的包圍之中，微生物無處不在。當某種傳染病流行時，會感染一部分人，有時還會擴散開來，形成一種流行的趨勢。然而，并不是所有的人都會被感染，有的人即使感染也不發病，反映出這部分人機體形成了抗御外來物質的能力，稱為免疫狀態。

免疫系統是機體擔負免疫功能的物質基礎，包括免疫器官、免疫細胞及免疫分子三部分。其主要功能是防御、監視、清除，分為非特異性免疫和特異性免疫兩大類。免疫系統具有兩面性，正常工作的免疫系統可保持機體各方面功能的健康運行，而當免疫系統受損或失控時，機體的免疫狀態降低，易使人患病。所以免疫平衡很重要，如何精準科學的評估免疫狀態是一項重要的技術。

傳統的免疫學檢測方法評估免疫狀態強弱的有：①免疫五項，即免疫功能的檢測。檢測血液中免疫球蛋白和補體的含量。②血常規，利用細胞計數的方法分析外周血中白細胞的數量，白細胞數量的增高表明體內存在炎癥反應。③自身抗體檢測，用酶聯免疫法或免疫熒光法等檢測抗體的陽性率，不同抗體的陽性率與各種自身免疫性疾病的發生相關。④感染免疫檢測，即針對特定細菌、病毒相關的一類抗體檢測。⑤通過飲食、生活習慣、心理健康等影響免疫功能的因素間接評估免疫狀態。目前，部分醫院及第三方檢測機構，大多通過流式細胞儀分選，可以了解各類免疫細胞群體的數量和比例。然而，傳統的免疫學檢測方法存在一定的局限性，均無法全面評估免疫狀態。

近年來，利用免疫組庫高通量測序技術從分子水平研究免疫與健康疾病的方法也被廣泛應用。免疫組庫(Immune Repertoire，IR)被定義為在任何特定時間下，機體適應性免疫系統的T淋巴細胞表面受體(T cell receptor，TCR)和B淋巴細胞表面受體(B cellreceptor，BCR)的總和。在T/B細胞成熟過程中，會發生VDJ基因的重排，在重排過程中隨機選取一種V、D和J基因串聯在一起，組成TCR/BCR的可變區，同時還會在接合部位發生堿基的隨機的插入和刪除，因此幾乎每個新產生的T/B細胞的TCR/BCR基因都各不相同，組成數量龐大的TCR/BCR免疫組庫，賦予機體識別各種不同抗原的能力。而通過高通量測序對TCR/BCR的編碼基因進行分析，可以對免疫組庫進行解碼，用于對免疫系統的多樣性和特異性進行分析。

隨年齡的增長，淋巴細胞多樣性下降，導致免疫功能下降。過多的內外部環境壓力及疾病會導致免疫系統過多過早的消耗，造成免疫多樣性明顯低于同齡人。

因此，亟需一種能夠精準評估免疫狀態的方法，在充分了解免疫狀態的基礎上，可更為精準的找到維持免疫系統的正常運轉的方式，才能更好的抵御疾病的發生。

發明內容

基于此，有必要針對上述問題，提供一種用于非診斷治療目的的免疫狀態評估方法，從免疫應答功能與抗原識別能力檢測相結合出發，全面評估個體抵抗疾病的能力。

一種用于非診斷治療目的的免疫狀態評估方法，包括：

免疫組庫分析：取待評估目標的生物樣本，提取其中基因組DNA或RNA，構建免疫組庫文庫；進行高通量測序，分析TCR和/或BCR的克隆多樣性，獲得免疫組庫指標值；