[發明專利]一種酶催化制備氟伐二醇的方法

有效

• 申請號: 202011248032.5
• 申請日: 2020-11-10
• 公開（公告）號: CN112322676B
• 公開（公告）日: 2022-06-07
• 發明（設計）人: 程加銘;張錦濤;陳恬;顧學新;谷緒頂;楊晶晶
• 申請（專利權）人: 江蘇八巨藥業有限公司
• 主分類號: C12P17/10
• 分類號: C12P17/10;C12N11/10;C12N11/14;C12N9/04
• 代理公司: 臺州市方信知識產權代理有限公司 33263
• 代理人: 公孫鴻健

本發明涉及一種酶催化制備氟伐二醇的方法，屬于藥物合成技術領域。為了解決現有的選擇性差的問題，提供一種酶催化制備氟伐二醇的方法，該方法包括在弱堿性物質存在的條件下，使在供氫體和固載后的羰基還原酶的作用下將式Ⅰ化合物氟伐醇酮通過酶法反應轉化為產物式Ⅱ化合物氟伐二醇；固載后的所述羰基還原酶的序列如SEQ ID NO.1所示。本發明能夠極大的提高了手性選擇性的反應效率，減少了副產物的產生，且產物手性純度高的效果。

技術領域

本發明涉及一種酶催化制備氟伐二醇的方法，屬于藥物合成技術領域。

背景技術

氟伐二醇作為氟伐他汀的主要中間體，其合成是必不可少的，但是目前主流的合成方法還是化學合成法，如中國專利申請(公開號：CN 1978428A)主要用氟伐主環作為原料經和乙酰乙酸叔丁酯、氫化鈉、丁基鋰反應合成氟伐醇酮，然后，氟伐醇酮再先經過硼氫化鈉、二乙基甲氧基硼烷還原環合，在經過雙氧水氧化水解的到氟伐二醇。然而，該傳統化學方法制備氟伐二醇工藝繁瑣，成本高，危險系數高等缺點。因此，研究反應溫和且成本低，工藝簡單的酶催化工藝是非常有必要的。

又如中國專利申請(公開號：CN 1687032A)公開的一種以氟伐主環為原料來合成相應的氟伐二醇。同樣是采用化學合成的方式進行，且工藝路線長且成本高和選擇性不高的問題，存在產物構型分離難。

發明內容

本發明針對以上現有技術中存在的缺陷，提供一種酶催化制備氟伐二醇的方法，解決的問題是如何提供采用酶法合成且產物手性選擇性高。

本發明的目的是通過以下技術方案得以實現的，一種酶催化制備氟伐二醇的方法，該方法包括以下步驟：

在弱堿性物質存在的條件下，使在供氫體和固載后的羰基還原酶的作用下將式Ⅰ化合物氟伐醇酮通過酶法反應轉化為產物式Ⅱ化合物氟伐二醇；

固載后的所述羰基還原酶的序列如SEQ ID NO.1所示。

通過上述的羰基還原酶進行酶催化作用于底物，且通過將羰基還原酶進行固載后，在弱堿性條件下能夠使對底物的轉換具有高選擇性，也就是說極大的提高了手性選擇性產物的合成，且反應效率高，使得到本發明的產物具有手性選擇性高，也減少了副產物的產生，產品手性純度高，能夠有效避免了不同產物構型導致的分離難的缺陷，能夠使產品純度達到99％以上，且其ee值也能夠達到99.5％以上；同時，由于采用羰基還原酶進行酶法反應，使反應條件溫和，更易于操作，且所采用的原料成本低，反應的安全性高，更有利于實際生產操作，這里的羰基還原酶可直接通過購買得到，也可以根據本發明的SEQ ID NO.1所示的序列按照一般的方法得到。

在上述酶催化制備氟伐二醇的方法中，作為優選，所述固載后的羰基還原酶采用硅藻土作為載體進行固載。能夠很好的將羰基還原酶進行吸附固載，且也能夠保證羰基還原酶的活性，具有高反應選擇性的特性。更進一步的講，所述固載后的羰基還原酶具體采用以下方法得到：

將羰基還原酶和硅藻土加入醚類溶劑中進行混合充分后，過濾，收集濾餅進行凍干后，得到相應的固載后的羰基還原酶。通過采用硅藻土進行固載后，能夠極大的提高羰基還原性的催化活性，大大的提升轉化過程中的產物手性選擇性，具有反應效率高的優點。同時，由于采用硅藻土對羰基還原酶進行固載，能夠提高酶的重復利用，實現多次套用的優點，且重復利用后也能夠保證手性選擇性和轉化率的效果。作為更進一步的優選，所述混合充分后還包括加入海藻酸鈉和水進行攪拌混合，再進行過濾處理。通過硅藻土固載后且在過濾處理之前，再采用海藻酸鈉進行包埋處理，能夠有效的避免出現羰基還原酶的固載脫落的現象，更好的提高固載后的酶的利用率，也大大的降低了生產成本，且經過包埋處理也能夠提高酶催化還原的手性選擇性，提高反應效果。更進一步的優選，所述硅藻土與羰基還原酶的質量比為1：1.2～1.5。最好使上述海藻酸鈉與羰基還原酶的質量比為1：3～4。具有更好的包埋效果。