[發明專利]一種具有抗氧化作用的珍珠粉多肽類提取物及其制備方法

在審

• 申請號: 202011246505.8
• 申請日: 2020-11-10
• 公開（公告）號: CN112390848A
• 公開（公告）日: 2021-02-23
• 發明（設計）人: 王龑;裴晶瑩;孫培龍;阮華君;羅賢俊;唐長明;鄒仙果;魏狄蘭;廖杰
• 申請（專利權）人: 浙江長生鳥健康科技股份有限公司
• 主分類號: C07K1/14
• 分類號: C07K1/14;C07K1/34;A61K8/64;A61K8/98;A61Q19/08;A61Q19/02
• 代理公司: 浙江千克知識產權代理有限公司 33246
• 代理人: 冷紅梅

本發明提供了一種具有抗氧化作用的珍珠粉多肽類提取物及其制備方法。本發明通過弱酸法提取珍珠粉水溶性蛋白，優化反應條件(pH、溫度、反應時間等)，分析樣品的羥基自由基清除效果，并測得蛋白得不同分子量占比情況，經測試證明該提取物具有良好的皮膚美白效果。本發明采用常溫醋酸溶液輔助提取，獲得了一個水溶性蛋白純度較高(≥40.05％)的基質蛋白提取物，得到的蛋白均為10,000Da以下，0～2000Da的多肽含量占總蛋白的70％以上，更有利于人體吸收，其體外具有顯著的羥基自由基清除效果；且工藝程序較為簡單，無精細分離步驟，制備效率較高且成本較低，適合后續中試和工業化生產。

(一)技術領域

本發明涉及一種具有抗氧化作用的珍珠粉多肽類提取物及其制備方法。

(二)背景技術

珍珠具備解痘療毒、美白皮膚以及清目膚翳等功效。珍珠粉在醫藥、材料、護膚品等領域應用較廣，具有加速愈合傷口、防止傷口發炎的醫用療效(Hsin-Ling Yang,Antihemolytic and antioxidant properties of pearl powder agains2,2'-azobis(2-amidinopropane)dihydrochloride-induced hemolysis and oxidative damage toerythrocyte membrane lipids and proteins.Journal of Food and Drug Analysis,2017)。珍珠粉精深加工一般是將下層珠粉化、乳化以及液化，制成藥品、保健品、美容化妝品和其它綜合珍珠制品(Hui-Fang Chiu,Efficacy of protein rich pearl powder onantioxidant status in a randomized placebo-controlled trial,Journal of Foodand Drug Analysis,2018)。現有的珍珠粉水解技術分為水溶性技術和非水溶性技術，水溶性技術通常采用乳酸水解法、酸-酶水解法、鹽酸水解法、超聲水解法、微波水解法、酶水解法、酸水解法等。非水溶性技術是以納米珍珠粉為原料，采用低溫減壓真空干燥、超音速氣流粉碎機粉碎、噴霧干燥等物理方法進行加工。如采用中性蛋白酶、乳酸水解珍珠粉,以水解度為指標,對加酶量、酶解溫度、酶解時間、乳酸用量進行工藝參數優化制備水溶性珍珠粉,并測定其分子質量分布和清除超氧陰離子自由基能力(Yi-Chen Li,Pearl extractenhances the migratory ability of fibroblasts in a wound healing model,Pharmaceutical Biology,2013)。也可用納米珍珠粉為原料，加入菠蘿蛋白酶溶液和木瓜蛋白酶溶液進行溶解，低溫減壓真空干燥，超音速氣流粉碎，得到富含活性肽的納米珍珠粉。

珍珠粉水解技術影響著珍珠提取物的抗氧化及美白功效。“活性多肽”一般指含有2個至10個氨基酸的多肽，分子量在2kDa以下，是一類具有重要生理功能的活性物質，功能因子。以珍珠多肽為主的珍珠提取物，將其添加到B16黑色瘤細胞培養液中，研究珍珠提取物美白護膚的功效。在抑制黑色素方面，珍珠提取物較熊果苷能更顯著抑制酪氨酸酶活性，珍珠提取物半抑制量為80mg/L(楊安全，珍珠提取物的美白功效研究，藥物生物技術，2016)。研究發現，濃度為0.25％、0.5％、0.75％的珍珠水解液可以抑制黑色素細胞的黑色素合成，3種濃度下的珍珠水解液均可抑制相關基因TRP1 mRNA的表達(鄧云云，珍珠水解液的美白作用機理研究，中國現代中藥，2017)。

楊安全等人發明了“一種從珍珠蛋白中酶解分離珍珠活性多肽的方法”，聲明了珍珠蛋白在皮膚美白護膚方面的作用。在珍珠蛋白溶液中加入磷酸鹽緩沖液和中性蛋白酶，酶催化反應結束后在沸水浴滅酶即為珍珠活性多肽(公布號CN104911239A)。

龍鳳娣的發明“一種納米珍珠有機基質萃取與分子量分級的方法”，通過離心濃縮濾膜裝置的離心濃縮分離方式，分離出分子量大于5kDa的第一珍珠有機基質萃取物及分子量小于5kDa的第二珍珠有機基質萃取物(公布號CN101381400A)。