[發明專利]一種油氣微生物基因勘探方法

在審

• 申請號: 202011229657.7
• 申請日: 2020-11-06
• 公開（公告）號: CN112301138A
• 公開（公告）日: 2021-02-02
• 發明（設計）人: 王青華
• 申請（專利權）人: 新方舟能源科技（天津）有限公司
• 主分類號: C12Q1/689
• 分類號: C12Q1/689;C12Q1/64;C12Q1/24;C12Q1/06;C12Q1/04
• 代理公司: 長春科宇專利代理有限責任公司 22001
• 代理人: 馬寶來

1.一種油氣微生物基因勘探方法，包括以下步驟：

S1，確定勘探區域的采樣點；

S2，確定正演區域的采樣點，所述正演區域的采樣點為勘探區域的探區內或鄰區的已知井上方的采樣點；

S3，設計正演區域采樣方案，采樣并保存樣品；

S4，樣品提取DNA；

S5，對所述正演區域的樣品進行高通量測序，讀取劃分到種的OTU值；

S6，建立所述勘探區域的油氣指示微生物指紋圖譜，識別出該勘探區內，氣指示有效菌和/或油指示有效菌；根據OTU值分別計算油指標和/或氣指標，比較油指標和/或氣指標的數值，確定有效油指標和/或有效氣指標；

S7，根據油氣指示微生物指紋圖譜識別出的氣指示有效菌和/或油指示有效菌設計相應的引物，進行熒光定量PCR檢測，分別得到采樣點的油指示微生物數值和/或氣指示微生物數值；

S8，結合微生物成果，地球物理和石油地質等資料，多學科、多領域的技術綜合確定油氣區。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述已知井包括干井、水井、顯示井和工業井中的一種或多種。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述高通量測序為16S rDNA基因或烴氧化相關基因的高通量測序。

4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述烴氧化相關的基因包括pmoA基因、mmoX基因、bmoX基因、alk系列基因和P450基因中的一種或多種。

5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述確定有效油指標和/或有效氣指標時，在油指標中，油/氣數值最大的前5個種，且數值大于2，確定為有效油指標；在氣指標中，氣/油數值最大的前5個種，且數值大于2，確定為有效氣指標。

6.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，采樣的深度為20-100cm。

7.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，采樣量為50-100g。

8.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，樣品-20℃或者用保護液保存樣品。

9.根據權利要求8所述的方法，其特征在于，所述保護液含有DNase抑制劑和金屬離子螯合劑。

10.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，S3步驟的采樣中，通過以下步驟確定采樣點最適宜的采樣深度：

S31，分別在10、20、30、40、50、60、70、80、90、100cm處采樣；

S32，檢測50cm和60cm采樣深度的微生物總量；

S33，比較兩個采樣深度的微生物總量；

S34，沿兩個采樣深度微生物總量增多的方向，取最鄰近的另一個采樣深度檢測微生物總量；

S35，重復S33和S34步驟，直至沒有樣品可以檢測；

S36，最佳的采樣深度

其中，Hm為最大微生物總量采樣深度的對數值，a為常數，為6-9，b為矯正深度，為40-60cm，H為檢測微生物總量的各采樣深度，Hn為最小微生物總量采樣深度的對數值。