[發明專利]“自體裂解”沙門氏菌菌株、其制備方法及其在腫瘤治療中的應用

在審

• 申請號: 202011221994.1
• 申請日: 2020-11-05
• 公開（公告）號: CN114456992A
• 公開（公告）日: 2022-05-10
• 發明（設計）人: 劉陳立;王作偉;曾正陽;盛方芊;董宇軒;盧偉琪;郭旋
• 申請（專利權）人: 中國科學院深圳先進技術研究院
• 主分類號: C12N1/21
• 分類號: C12N1/21;A61K48/00;A61K35/74;A61K45/00;A61K31/7088;A61P35/00;A61P35/02;C12R1/42
• 代理公司: 北京三友知識產權代理有限公司 11127
• 代理人: 張培源;龐東成

1.一種通過敲除兼性厭氧菌代謝通路上必需基因，從而獲得在有氧與無氧條件下均無法生長菌株的方法，所述的菌株應用于體內腫瘤和癌癥治療時，可以抑制腫瘤生長和減小腫瘤體積。

2.根據權利要求1所述的方法，其中，所述兼性厭氧細菌菌屬包括：腸桿菌科細菌(大腸桿菌、肺炎桿菌、變形桿菌、腸桿菌、傷寒桿菌、沙門氏菌、志賀氏菌等)，葡萄球菌屬，鏈球菌屬，肺炎球菌，炭疽桿菌和白喉桿菌等；和/或

優選的是，所述兼性厭氧細菌是沙門氏菌屬物種(Salmonella)；和/或

優選的是，所述細菌是傷寒沙門氏菌(Salmonella typhi)；和/或

優選的是，所述兼性厭氧細菌是鼠傷寒沙門氏菌(Salmonella typhimurium)；和/或

優選的是，所述兼性厭氧沙門氏菌菌株包括來源于人、雞、狗、牛等。

3.根據權利要求1所述的方法，其中所述菌株在體外培養時培養基中需要額外添加2,6-二氨基庚二酸(別名：2,6-二氨基蒲桃酸；2,6-Diaminopimelic acid)或其類似物；和/或

所述兼性厭氧菌被敲除的必需基因是dapA或dapE基因。

4.根據權利要求1所述的方法，其中所述腫瘤和癌癥包括血癌(慢性白血病、急性白血病)，骨癌，淋巴癌(非霍奇金淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤)，腸癌(結腸癌、直腸癌)，肝癌，胃癌，盆腔癌(子宮頸癌、卵巢惡性腫瘤、子宮內膜癌、卵巢癌)，肺癌，乳腺癌，胰腺癌，膀胱癌，前列腺癌等。

5.一種按照權利要求1-4中任一項所述方法制備的菌株。

6.一種基因工程的沙門氏菌菌株，所述菌株中敲除dapA或dapE基因。

7.一種權利要求1-4中任一項所述方法制備的菌株或權利要求6所述的菌株的細菌療法，

優選的是，所述細菌療法與其他癌癥治療方法聯合應用，聯合應用的治療方法包括但不局限于手術、放療、化療等。

8.根據權利要求7所述的細菌療法，其中所述其他癌癥治療方法聯合應用包括：(a)該菌株的細菌療法聯合手術療法；(b)該菌株的細菌療法聯合放射治療；(c)該菌株的細菌療法聯合化學藥物：化療藥物包括烷化劑(尼莫司汀、卡莫司汀、洛莫司汀、環磷酰胺、異環磷酰胺、甘磷酰芥等)，抗代謝藥(去氧氟尿苷、多西氟鳥啶、6-巰基嘌呤、阿糖胞苷、氟鳥苷、替加氟、吉西他濱、卡莫氟、羥基脲、甲氨蝶呤、優福定、安西他濱等)，抗腫瘤抗生素(放線菌素、阿柔比星、表柔比星、絲裂霉素、培洛霉素、平陽霉素、吡柔比星等)，植物類抗癌藥物(伊立替康、三尖杉酯堿、羥基喜樹堿、長春瑞賓、紫杉醇、泰索帝、拓撲替康、長春新堿、長春地辛、長春堿等)，激素(阿他美坦、阿那曲唑、安魯米特、來曲唑、福美坦、甲他孕酮、他莫昔芬等)免疫抑制劑及其他抗癌藥物如門冬酰胺酶、卡鉑、順鉑、達卡巴嗪、奧沙利鉑、樂沙定、可鉑澳殺、米托蒽醌、丙卡巴肼等；(d)該菌株的細菌療法聯合生物治療；(e)該菌株的細菌療法聯合中醫中藥治療。

9.權利要求1-4中任一項所述方法制備的菌株或權利要求6所述的菌株在體外誘導表達藥物或者作為載體攜載藥物中的應用，所述藥物用于治療癌癥。

10.根據權利要求9所述的菌株在體外誘導表達藥物或者作為載體攜載藥物中的應用，其中所述藥物包括：(a)表達具有癌癥治療效果的蛋白物質或者多肽物質；(b)表達具有癌癥治療效果的RNA；(c)作為載體攜載經修飾的RNA藥物。