[發(fā)明專利]一種同時測定祛痘組合物中不同特征成分的HPLC檢測方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 202011209945.6
• 申請日: 2020-11-03
• 公開（公告）號: CN112415109A
• 公開（公告）日: 2021-02-26
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉林峰;吳知情
• 申請（專利權(quán)）人: 廣州那比昂生物科技有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/34
• 代理公司: 北京品源專利代理有限公司 11332
• 代理人: 鞏克棟

1.一種同時測定祛痘組合物中不同特征成分的HPLC檢測方法，其特征在于，所述HPLC檢測方法包括以下步驟：將祛痘組合物配制成樣品，之后經(jīng)HPLC檢測梯度洗脫，得到檢測結(jié)果，之后利用標(biāo)準(zhǔn)曲線計算特征組分含量；

所述特征成分包括綠原酸、咖啡酸、龍膽苦苷、小檗堿、黃芩苷或大黃素中任意一種或至少兩種的組合。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的同時測定祛痘組合物中不同特征成分的HPLC檢測方法，其特征在于，所述梯度洗脫的溶劑為甲醇和磷酸超純水溶液；

優(yōu)選地，所述磷酸超純水溶液的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.03-0.08％。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的同時測定祛痘組合物中不同特征成分的HPLC檢測方法，其特征在于，所述梯度洗脫按以下程序進行：第0min時洗脫液中甲醇的體積占比為10％，磷酸超純水溶液的體積占比為90％，之后勻速變化至第6min時甲醇的體積占比為25％，磷酸超純水溶液的體積占比為75％，之后勻速變化至第15min時甲醇的體積占比為30％，磷酸超純水溶液的體積占比為70％，之后勻速變化至第21min時甲醇的體積占比為40％，磷酸超純水溶液的體積占比為60％，之后勻速變化至第27min時甲醇的體積占比為55％，磷酸超純水溶液的體積占比為45％，最后勻速變化至第40min時甲醇的體積占比為90％，磷酸超純水溶液的體積占比為10％。

4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項所述的同時測定祛痘組合物中不同特征成分的HPLC檢測方法，其特征在于，所述將祛痘組合物配制成樣品包括以下步驟：將祛痘組合物用純化水回流提取，之后過濾，取濾液經(jīng)大孔吸附樹脂吸附洗脫，之后蒸發(fā)洗脫液、濃縮，用甲醇定容，過膜，得到所述樣品；

優(yōu)選地，所述回流的溫度為75-85℃；

優(yōu)選地，所述回流的時間為50-70min。

5.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一項所述的同時測定祛痘組合物中不同特征成分的HPLC檢測方法，其特征在于，所述HPLC采用Agilent InfintyLab Poroshell 120SB-C₁₈色譜柱，所述色譜柱的規(guī)格為150mm×4.60mm，填料粒徑為2.8μm。

6.根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項所述的同時測定祛痘組合物中不同特征成分的HPLC檢測方法，其特征在于，所述HPLC檢測的柱溫為35-45℃。

7.根據(jù)權(quán)利要求1-6中任一項所述的同時測定祛痘組合物中不同特征成分的HPLC檢測方法，其特征在于，所述梯度洗脫的流速為0.8-1.2mL/min。

8.根據(jù)權(quán)利要求1-6中任一項所述的同時測定祛痘組合物中不同特征成分的HPLC檢測方法，其特征在于，所述HPLC檢測的進樣體積為8-12μL。

9.根據(jù)權(quán)利要求1-6中任一項所述的同時測定祛痘組合物中不同特征成分的HPLC檢測方法，其特征在于，所述HPLC檢測的波長為260-300nm。

10.根據(jù)權(quán)利要求1-6中任一項所述的同時測定祛痘組合物中不同特征成分的HPLC檢測方法，其特征在于，所述標(biāo)準(zhǔn)曲線由以下步驟得到：取特征成分的標(biāo)準(zhǔn)樣品用甲醇溶解稀釋，之后按照所述梯度洗脫程序進行HPLC檢測，根據(jù)檢測結(jié)果計算標(biāo)準(zhǔn)曲線。