[發(fā)明專利]一種裙帶菜抗腫瘤小分子肽及其制備方法和應用在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202011209544.0 | 申請日： | 2020-11-03 |
| 公開（公告）號： | CN112301082A | 公開（公告）日： | 2021-02-02 |
| 發(fā)明（設計）人： | 于慧;劉海梅;趙芹;吳紅艷 | 申請（專利權(quán)）人： | 魯東大學 |
| 主分類號： | C12P21/06 | 分類號： | C12P21/06;C07K1/34;A23L33/18 |
| 代理公司： | 北京中濟緯天專利代理有限公司 11429 | 代理人： | 潘劍敏 |
| 地址： | 264025 山東*** | 國省代碼： | 山東;37 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 裙帶菜 腫瘤 分子 及其 制備 方法 應用 | ||
1.一種裙帶菜抗腫瘤小分子肽的制備方法，其特征在于，步驟如下：
(1)挑選裙帶菜清水浸泡，漂洗干凈后切成適當?shù)拈L度，在20～40℃下進行低溫干燥，經(jīng)粗粉碎后采用超聲波粉碎機粉碎至顆粒粒度為4μm以下；
(2)向步驟(1)獲得的裙帶菜粉末中加入其質(zhì)量25～100倍的超純水，攪拌均勻后使用0.01～0.2mol/L的HCl和NaOH來調(diào)節(jié)反應體系的pH值至1～2，加入胃蛋白酶，在控制條件下進行酶解，酶解完成后再采用相同方法調(diào)節(jié)pH值至7～9；加入胰蛋白酶在控制條件下進行酶解；
(3)酶解結(jié)束后，向步驟(2)的酶解液中加入乙醇至體系乙醇體積分數(shù)為40～60％，靜置12～24h，離心取上清液。
(4)將步驟(3)得到的上清液，經(jīng)減壓濃縮后，采用分子量為3KD的超濾膜超濾，截留分子量大小為3KD以下的酶解液，然后采用納濾進行脫鹽處理；
(5)將步驟(4)得到的溶液進行冷凍干燥，即可獲得分子量大小為3KD以下的裙帶菜抗腫瘤小分子肽。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟(1)中的裙帶菜可為裙帶菜的葉、梗、孢子葉及其提糖后的副產(chǎn)物。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟步驟(2)中加入胰蛋白酶進行酶解之后，采用相同方法調(diào)節(jié)pH值至6～8，加入復合蛋白酶在控制條件下進行酶解。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟步驟(2)胃蛋白酶的酶解條件為：體系pH值調(diào)至1～2，1:15000U/mg胃蛋白酶的添加量為3～8％(w/w)，酶解溫度為37℃，酶解時間為1～4h；
胰蛋白酶的酶解條件為：體系pH值調(diào)至7～9，1:250U/mg胰蛋白酶的添加量為1～6％(w/w)，酶解溫度為37℃，酶解時間為1～4h。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述復合蛋白酶的酶解條件為：體系pH值調(diào)至6～8，1.5AU/g復合蛋白酶的添加量為0.005～0.4％(w/w)，酶解溫度為40～60℃，酶解時間為1～8h。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟(3)所述的離心條件為5000～12000r/min，離心15～40min。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟(4)所述納濾為0.15KD、0.2KD和0.25KD的納濾膜。
8.一種裙帶菜抗腫瘤小分子肽，其特征在于，采用如權(quán)利要求1-7所述的制備方法制備得到。
9.一種裙帶菜抗腫瘤小分子肽在制備抗腫瘤食品或食品組合物中的應用。
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