[發明專利]一種新冠病毒總抗體酶聯免疫檢測試劑盒

在審

• 申請號: 202011205979.8
• 申請日: 2020-11-02
• 公開（公告）號: CN114441751A
• 公開（公告）日: 2022-05-06
• 發明（設計）人: 王玲玲
• 申請（專利權）人: 鄭州達諾生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/543
• 代理公司: 鄭州中原專利事務所有限公司 41109
• 代理人: 霍彥偉;王喚霞

本發明提供一種新冠病毒總抗體酶聯免疫檢測試劑盒，包括包被新冠病毒抗原的包被板，含有HRP標記鼠抗人輕鏈κ鏈抗體的酶結合物，系統反應液、陰陽性對照液和TMB底物液。可以快速、準確測定樣品中新冠病毒抗體的是否存在，產品采用間接法檢測總抗體，相比夾心法生產物料成本可以降低，而且標記工藝更加簡潔。

技術領域

本發明涉及免疫學檢測技術領域，尤其是涉及一種新冠病毒總抗體酶聯免疫檢測試劑盒。

背景技術

冠狀病毒是一大類病毒，引起的疾病從普通感冒到更嚴重的疾病，如中東呼吸綜合征（MERS-CoV）和嚴重急性呼吸綜合征（SARS-CoV）。感染的常見癥狀包括呼吸系統癥狀、發燒、咳嗽、呼吸急促和呼吸困難。在更嚴重的病例中，感染可導致肺炎、嚴重急性呼吸綜合征、腎衰竭甚至死亡。

被新冠病毒感染后，人體免疫系統會產生相對應的IgA、IgM、IgG抗體，通過外周血血清可以檢測標志物是否存在，從而推斷是否感染。血清學試驗已成為檢測新冠病毒感染的必要方法，它更容易操作，檢測時間短，檢測成本低。不同Ig類型會在感染后不同時間產生，且產生量也有較大差異，血清學檢測呈陽性表明存在新冠病毒抗體，證實既有過去感染的可能，也有潛在的當前感染，總抗體作為第一步初篩更有價值。目前有雙抗原夾心法檢測總抗體的試劑產品，但是對抗原標記工藝要求較高，容易出現漏檢。

天然Ig分子含有四條異源性多肽鏈，其中，分子量較大的兩條鏈稱為重鏈(heavychain，H)，而分子量較小的兩條鏈稱為輕鏈(Light chain，L)。重鏈恒定區的氨基酸組成和排列順序不同，其抗原性也不同。據此，可將Ig分為5類(class)，即IgM、IgD、IgG、IgA和IgE，其相應的重鏈分別為μ鏈、δ鏈、γ鏈、α鏈和ε鏈。輕鏈可分為兩種，分別為kappa(κ)鏈和lambda(λ)鏈。據此，可將lg分為兩型(type)，即κ型和λ型。一個Ig分子上兩條輕鏈的型別總是相同的。不同類Ig既存在κ型，也存在λ型。正常人血清Ig的κ：λ約為2：1。

發明內容

為解決上述問題，本發明提供一種新冠病毒總抗體酶聯免疫檢測試劑盒，可以快速、準確測定樣品中新冠病毒抗體的是否存在，產品采用間接法檢測總抗體，相比夾心法生產物料成本可以降低，而且標記工藝更加簡潔。

本發明的目的是以下述方式實現的：一種新冠病毒總抗體酶聯免疫檢測試劑盒，包括包被新冠病毒抗原的包被板，含有HRP標記鼠抗人輕鏈κ鏈抗體的酶結合物，系統反應液、陰陽性對照液和TMB底物液。

系統反應液中包括緩沖液、防腐劑、酪蛋白、溴甲酚紫、吐溫20。

緩沖液為Tris-NaCl緩沖液或PBS緩沖液，防腐劑為Proclin 300、NaN3、卡松中的至少一種。

酶結合物由HRP標記的鼠抗人輕鏈κ鏈抗體與酶結合物的稀釋液按體積比1:（4800—5200）的比例混合得到。

酶結合物的稀釋液包含有酪蛋白。

酶結合物的稀釋液中還包括緩沖液、防腐劑，緩沖液為Tris-NaCl緩沖液或PBS緩沖液，防腐劑為Proclin 300、NaN3、卡松中的至少一種。

酶結合物的稀釋液中還包括保護蛋白，保護蛋白為小牛血清、牛血清白蛋白、Casein中的至少一種。

陰陽性對照液包括陽性對照液和陰性對照液；陰性對照液包括緩沖液、防腐劑、保護蛋白和制霉菌素，緩沖液為Tris-NaCl緩沖液或PBS緩沖液，防腐劑為Proclin 300、NaN3、卡松中的至少一種；保護蛋白為小牛血清、牛血清白蛋白、Casein中的至少一種；陽性對照液為滅活新冠病毒抗體與陰性對照稀釋液按體積比1:1000的比例混合得到。

檢測試劑盒還包括洗液和終止液。

其作用原理如下：