[發(fā)明專利]一種褐藻多糖硫酸酯的提取方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011204964.X
• 申請(qǐng)日: 2020-11-02
• 公開（公告）號(hào): CN112375154A
• 公開（公告）日: 2021-02-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張麗欣;鄧博
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 江蘇泰德醫(yī)藥有限公司
• 主分類號(hào): C08B37/00
• 分類號(hào): C08B37/00
• 代理公司: 江蘇圣典律師事務(wù)所 32237
• 代理人: 張陽(yáng)

本發(fā)明公開了一種褐藻多糖硫酸酯的提取方法，其具體步驟如下：首先以電子束輻照褐藻粉，然后加入酮類溶劑，過(guò)濾后取濾渣；利用熱水浸提濾渣，取濾液減壓濃縮后加入醇類溶劑，過(guò)濾并取沉淀；將沉淀溶解于水中，利用陰離子交換樹脂提純，減壓濃縮后即獲得所述褐藻多糖硫酸酯；本申請(qǐng)首次應(yīng)用電子輻照技術(shù)提取褐藻中的褐藻多糖硫酸酯，提高了褐藻多糖硫酸酯的提取率，同時(shí)降低了水提的溫度，確保褐藻多糖硫酸酯大分子結(jié)構(gòu)完整，為后續(xù)褐藻多糖硫酸酯的進(jìn)一步開發(fā)利用奠定了基礎(chǔ)。

技術(shù)領(lǐng)域

本申請(qǐng)涉及化合物制備領(lǐng)域，特別是一種褐藻多糖硫酸酯的提取方法。

背景技術(shù)

我國(guó)是世界上海帶(Laminaria japonica)養(yǎng)殖量最大的國(guó)家，并作為傳統(tǒng) 食品和中藥原料。海帶等褐藻中含有豐富的巖藻聚糖硫酸酯(Fuciodan)，除傳 統(tǒng)的藥用外，在傳統(tǒng)的加工中含有大量的巖藻聚糖硫酸酷的殘?jiān)?，通常都沒有進(jìn) 一步的加工利用而被丟棄,這不僅污染了自然環(huán)境,還使寶貴的天然資源沒有得 到充分地利用,造成極大的浪費(fèi)。

現(xiàn)有研究發(fā)現(xiàn)從褐藻中提取的褐藻多糖硫酸酯(又稱巖藻聚糖硫酸酯、巖藻 多糖硫酸酯等)是一種褐藻中特有的含有硫酸酯的天然水溶性活性多糖。巖藻聚 糖硫酸酯是一種含有硫酸醋的水溶性雜聚糖，是褐藻中特有的一種化學(xué)組分。研 究發(fā)現(xiàn)巖藻聚糖硫酸酯在醫(yī)學(xué)方面具有獨(dú)特的功效，具有抗凝血、抗腫瘤、抗病 毒、抗血栓、抗HIV、提高免疫力、降血脂等生物活性，是陸地植物成分所無(wú)法 比擬的，而且?guī)r藻聚糖硫酸酯的化學(xué)性質(zhì)尤其是分子量、硫酸根含量和巖藻糖含 量對(duì)它的活性影響很大，因此，巖藻聚糖硫酸酯成為當(dāng)今天然海洋藥物主攻的重 點(diǎn)之一。而且?guī)r藻聚糖硫酸酯來(lái)源豐富，成本低廉，在日本、美國(guó)作為預(yù)防和治 療癌癥及血栓疾病的藥已進(jìn)入市場(chǎng)。德國(guó)和挪威也分別開展了該物質(zhì)在抗HIV及抑制白細(xì)胞生長(zhǎng)方面的研究。

巖藻多聚糖硫酸酯是一類獨(dú)特的結(jié)合有硫酸基團(tuán)的多糖，其單糖主要由L- 巖藻糖及木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖和鼠李糖、少數(shù)含有阿拉伯糖組成，其 糖醛酸以葡萄糖醛酸或甘露糖醛酸為主，有的含有半乳糖醛酸，其巖藻糖含量占 12.9％-4.62％、硫酸基含量為14.3％-38.1％和糖醛酸含量0.62％-20.2％。通過(guò)NMR 分析，發(fā)現(xiàn)其碳鏈骨架是α-l,3連接巖藻糖；有高度的分支，分支主要是α-1,2 連接的單一單元。硫酸酯基主要在O-4位上，部分在O-2位上，部分α-1,3連 接的巖藻糖殘基O-2位已被乙?；r藻聚糖硫酸酯[(C₆H₁₀O₇S)_n]的分子量從幾 萬(wàn)到幾十萬(wàn)不等。

目前褐藻多糖硫酸酯常規(guī)提取分離純化工藝步驟如下(以海帶為例)：海帶 →干燥→粉碎→海帶粉→加丙酮→過(guò)濾→濾渣→干燥→熱水提取(80～95℃)→ 濾液→減壓濃縮→乙醇→沉淀→褐藻多糖硫酸酯粗品→陰離子交換樹脂→褐藻 多糖硫酸酯精品(Nishino,T.et al:Carbohydr.Res.1989,186:119-129.)。 由于海帶質(zhì)地堅(jiān)韌，細(xì)胞壁較厚，現(xiàn)有的海帶巖藻聚糖硫酸酯常規(guī)提取分離純化 工藝和方法提取率不高，常規(guī)的提取率只有4～8％不等，同時(shí)，其硫酸酯生物活 性基團(tuán)遇酸或堿或遇長(zhǎng)時(shí)間的高溫不穩(wěn)定，而現(xiàn)有80-95℃的水提方式，可能對(duì) 部分硫酸酯基團(tuán)產(chǎn)生水解或破壞，故傳統(tǒng)的提取分離純化工藝方法容易使其失去 硫酸酯基而失去生物活性，進(jìn)而限制了褐藻多糖硫酸酯的應(yīng)用。因此，如何在保 證硫酸酯大分子基團(tuán)完整性的前提下提高其提取效率，已成為本領(lǐng)域亟待解決的 技術(shù)難題。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)上述問(wèn)題，本申請(qǐng)?zhí)峁┮环N利用電子束輻照技術(shù)提取海帶巖藻聚糖硫酸 酯的方法，提取率較傳統(tǒng)的工藝和方法提高至2～3倍，并能保持硫酸酯基團(tuán)原有 結(jié)構(gòu)和組成不被破壞。本申請(qǐng)是通過(guò)如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：

一種褐藻多糖硫酸酯的提取方法，其具體步驟如下：

1)以電子束輻照褐藻粉(優(yōu)選60目)，獲得輻照后的褐藻粉；

2)向輻照后的褐藻粉中加入酮類溶劑，過(guò)濾并取濾渣，干燥，獲得干燥后的濾 渣；