[發(fā)明專利]手性1，3-二羥基-1-芳基丙酮化合物的合成方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011199867.6
• 申請日: 2020-10-30
• 公開（公告）號: CN112852793B
• 公開（公告）日: 2021-11-19
• 發(fā)明（設計）人: 姚培圓;李宇;崔云鳳;陳曦;馮進輝;吳洽慶;朱敦明;馬延和
• 申請（專利權）人: 中國科學院天津工業(yè)生物技術研究所
• 主分類號: C12N9/88
• 分類號: C12N9/88;C12P7/26
• 代理公司: 天津市三利專利商標代理有限公司 12107
• 代理人: 楊歡

1.一種生物催化合成手性1，3-二羥基-1-取代芳基丙酮的方法，其特征在于，利用丙酮酸脫羧酶催化羥基丙酮酸與不同取代基的苯甲醛反應得到手性1，3-二羥基-1-取代芳基丙酮；具體包括如下步驟：

a)將丙酮酸脫羧酶基因工程菌在LB培養(yǎng)基中進行擴增培養(yǎng)，誘導表達產(chǎn)生目的蛋白之后，離心收集菌體；所述的丙酮酸脫羧酶基因工程菌由氨基酸序列為SEQ ID NO：1的丙酮酸脫羧酶，進行基因合成得到相應的基因并構建到質粒載體，將質粒轉入工程菌中得到；

b)將收集到的菌體用緩沖液重懸，加入一定量的羥基丙酮酸、轉酮醇酶ThDP以及不同取代基的苯甲醛，在適當條件下反應一定時間；

c)反應一定時間之后，將反應體系離心去除蛋白，上清液用有機溶劑多次萃取，合并有機相，用無水硫酸鈉干燥，過濾，通過硅膠柱純化得到目標產(chǎn)物。

2.如權利要求1所述的生物催化合成手性1，3-二羥基-1-取代芳基丙酮的方法，其特征在于，步驟b)中不同取代基的苯甲醛為苯甲醛，4-氟苯甲醛，4-甲硫基苯甲醛，4-溴苯甲醛，4-氯苯甲醛，4-甲基苯甲醛，3-氯苯甲醛，3-氟苯甲醛或者3-甲基苯甲醛中的一種。

3.如權利要求1所述的生物催化合成手性1，3-二羥基-1-取代芳基丙酮的方法，特征在于，步驟b)中，所述的羥基丙酮酸由D-氨基酸氧化酶轉化D-絲氨酸獲得。

4.如權利要求3所述的生物催化合成手性1，3-二羥基-1-取代芳基丙酮的方法，特征在于，步驟b)中，所述的羥基丙酮酸由D-氨基酸氧化酶轉化D-絲氨酸獲得并且不經(jīng)分離直接作為底物反應。

5.如權利要求3或者4所述的生物催化合成手性1，3-二羥基-1-取代芳基丙酮的方法，特征在于，步驟b)中，所述的D-氨基酸氧化酶的氨基酸序列為SEQ ID NO：2。