[發明專利]一種酸酶法獲得小球藻蛋白肽的工業生產方法

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• 申請號: 202011197302.4
• 申請日: 2020-10-31
• 公開（公告）號: CN112266944A
• 公開（公告）日: 2021-01-26
• 發明（設計）人: 許團輝;李媛媛;陳璇;鄭曉輝;吳奕武;陳蝶玲;王文謙;鄭震堃
• 申請（專利權）人: 潤科生物工程(福建)有限公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K1/14;C07K1/34
• 代理公司: 汕頭市潮睿專利事務有限公司 44230
• 代理人: 林天普;朱明華

一種酸酶法獲得小球藻蛋白肽的工業生產方法，包括下述步驟：（1）將小球藻粉進行溶脹處理，得到小球藻料液；（2）酸水解：向步驟（1）溶脹后得到的小球藻料液加入鹽酸進行水解；（3）酶解：將經過酸水解的小球藻料液的pH值調節至7?9，然后在45?60℃溫度下，依次加入纖維素酶、堿性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶，酶解4?8小時，滅酶后濾除酶解液中的藻渣，得到上清液；（4）對上清液進行脫色處理，得到脫色液；（5）對步驟（4）得到的脫色液進行過濾后，得到小球藻蛋白肽溶液，小球藻蛋白肽溶液經噴霧干燥獲得小球藻蛋白肽。本發明結合酸水解和生物酶水解，優勢互補，能夠提高小球藻的酶解效率和蛋白肽提取率。

技術領域

本發明涉及生物技術領域，具體涉及一種酸酶法獲得小球藻蛋白肽的工業生產方法。

背景技術

小球藻（Chlorella spp.）是一類單細胞綠藻，被稱之為“藥物藻類”。小球藻細胞形態呈卵形或橢圓形，直徑在兩微米到十二微米之間，易于培養，生態分布廣，生長速度快，是優質的單細胞蛋白源，其蛋白質含量高達 50-65%，可作為高蛋白食品為人體迅速補充營養恢復體能。小球藻的氨基酸組成高于世界衛生組織（WHO）和聯合國糧農組織（FAO）頒布的用于人類營養的蛋白質標準，因此被 FAO 列為 21 世紀人類的健康食品。我國衛生部在2012 年批準蛋白核小球藻為新資源食品。小球藻蛋白具有抗氧化作用，可清除體內自由基；小球藻中的多種蛋白質具有抗腫瘤和免疫調節作用；小球藻蛋白具有解毒保肝、降壓等作用，在保健食品和醫藥具有廣闊的應用前景，備受大家關注。

小球藻干粉溶解性差、藻腥味濃重，細胞壁厚且堅韌，蛋白消化吸收差，而小球藻選擇合適的條件進行水解獲得的小分子肽不但大大提高溶解性，改善了口感，更重要的是獲得了抗氧化活性肽、抗腫瘤活性肽、免疫增強活性肽、增強活力活性肽等功能肽，同時小分子肽可被直接快速吸收，提高了消化吸收利用率。

目前水解蛋白獲得蛋白肽的方法主要有酸水解、堿水解、生物酶酶水解。

酸水解法是利用酸在一定度條件下水解蛋白獲得蛋白肽的方法。酸水解成本低、產物幾乎不被消旋，但水解過度易破壞色氨酸、天冬酰胺和谷氨酰胺等敏感氨基酸，甚至會破壞小分子肽。

堿水解法是利用堿在一定度條件下水解蛋白獲得蛋白肽的方法。堿水解法水解蛋白質色氨酸穩定，但絲氨酸和蘇氨酸尤其胱氨酸和半胱氨酸易損失，并且水解后氨基酸會消旋，使L型氨基酸變成D型氨基酸，水解率低。

酶水解法是利用生物酶在一定度條件下水解蛋白獲得蛋白肽的方法，酶水解法水解位點特定，可以有選擇的水解某些特定的氨基酸肽鍵，安全性高、反應條件溫和、副反應少、不破壞敏感氨基酸、水解產物在營養、風味、工藝等方面均優于酸、堿水解。

目前關于小球藻活性肽的實驗室研究較多，但是關于小球藻活性肽的工業化利用較少。目前小球藻的產業研究主要集中在單酶或復合酶一次水解（例如公布號為CN102851345A的中國發明專利申請說明書所公開的小球藻抗腫瘤多肽的制備方法，公布號為CN104120160A的中國發明專利申請說明書所公開的一種小球藻抗氧化肽的制備方法），或用一種酶水解一段時間后加入第二種酶（例如公布號為CN 109402204 A 的中國發明專利申請說明書所公開的一種小球藻免疫活性肽的制備方法，公布號為CN 109207544 A的中國發明專利申請說明書所公開的一種小球藻抗氧化多肽的制備方法），但由于小球藻細胞壁厚且富含纖維素，溶脹、均質等前處理破壁率較低，因此生物酶解效果較差，蛋白肽提取率較低。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供一種酸酶法獲得小球藻蛋白肽的工業生產方法，采用這種方法能夠提高小球藻的酶解效率和蛋白肽提取率。采用的技術方案如下：

一種酸酶法獲得小球藻蛋白肽的工業生產方法，其特征在于包括下述步驟：

（1）將小球藻粉進行溶脹處理，得到小球藻料液；