[發明專利]單孢菌酸在制備降脂藥物中的應用

在審

• 申請號: 202011188931.0
• 申請日: 2020-10-30
• 公開（公告）號: CN112274501A
• 公開（公告）日: 2021-01-29
• 發明（設計）人: 張萬存;陳林;尹震花;郭慶豐;張娟娟;張現偉;于志丹
• 申請（專利權）人: 河南省兒童醫院鄭州兒童醫院;黃河科技學院
• 主分類號: A61K31/194
• 分類號: A61K31/194;A61P3/06;A61P7/02;A61P9/10;C12P7/42;C12R1/645
• 代理公司: 鄭州聯科專利事務所(普通合伙) 41104
• 代理人: 張麗

1.單孢菌酸在制備降脂藥物中的應用，其特征在于，所述單孢菌酸的結構式如下：

2.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，單孢菌酸用于抑制前蛋白轉化酶枯草溶菌素9，應用時，單孢菌酸的添加濃度為200-800μM。

3.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，應用時，通過生物發酵方法，利用伊比利亞單孢囊菌制備單孢菌酸，所述制備方法，包括以下步驟：

(1)菌種活化：將伊比利亞單孢囊菌接種到培養基A上，25～30℃恒溫培養48-72小時，獲得活化菌種；

(2)發酵培養：將步驟(1)制備的活化菌種接種于培養基B中，溫度為20-25℃條件下靜置培養25-28天，獲得發酵物；

(3)粗提物的制備：將步驟(2)得到的發酵物用乙酸乙酯浸提，浸提液減壓濃縮并回收乙酸乙酯，得粗提物；

(4)硅膠柱層析分離：將步驟(3)制備的粗提物以二氯甲烷：甲醇體積比分別為100:1、100:2、100:4、100:8進行梯度洗脫，經薄層層析檢測，得到目標流份，再利用硅膠柱層析法或葡聚糖凝膠柱層析分離得到目標化合物即為單孢菌酸；

培養基A為PDA平板培養基；

培養基B的制備方法：將50-70g大米和100ml水混合，121℃下高壓滅菌20-40分鐘。

4.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，所述伊比利亞單孢囊菌保藏的分類學名稱為伊比利亞單孢囊菌Monosporascus ibericus CLC008，保藏于中國典型培養物保藏中心，保藏地址：中國.武漢.武漢大學；保藏日期：2020年7月3日，保藏號為：CCTCC NO：M2020274。

5.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，步驟(2)中培養基B的制備方法：將50-70g大米和100ml水混合，121℃下高壓滅菌20-40分鐘。

6.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，步驟(3)中具體的浸提方法為：在步驟(2)制備的發酵物中加入乙酸乙酯，在20～25℃下冷浸10-12h，并用紗布過濾，得到乙酸乙酯提取液，反復提取2-3次，合并提取液，然后，在溫度為30～34℃，真空度為0.07～0.08MPa的條件下減壓回收乙酸乙酯后，得粗提物。

7.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，步驟(4)中洗脫前，先將步驟(3)制備的粗提物用80～100目硅膠拌樣后裝柱，再用二氯甲烷、甲醇進行洗脫，其中粗提物與80～100目硅膠的重量比為1︰2，固定相為200～300目硅膠。