[發明專利]一種生物堿類化合物及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 202011157961.5
• 申請日: 2020-10-26
• 公開（公告）號: CN112409260B
• 公開（公告）日: 2022-02-08
• 發明（設計）人: 曹亮;肖偉;李海波;楊一帆;顧莎莎;王團結;楊彪;胡晗緋;王振中
• 申請（專利權）人: 江蘇康緣藥業股份有限公司
• 主分類號: C07D221/04
• 分類號: C07D221/04;A61P29/00;A61K31/435
• 代理公司: 北京卓恒知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 11394
• 代理人: 劉明芳

本發明公開了一種生物堿類化合物，通過理化性質和現代波譜學手段，對分離得到的化合物進行了結構鑒定。本發明還運用LPS誘導RAW 264.7細胞炎癥模型的活性篩選體系進行對其進行活性評價，發現該化合物對小鼠巨噬細胞系RAW 264.7有一定的保護作用，可以顯著抑制PGE2，顯示出較強的抗炎作用。

技術領域

本發明涉及醫藥技術領域，特別涉及一種新化合物及其制備方法和應用。

背景技術

青蒿為菊科植物黃花蒿(Artemisia annua L.)的干燥地上部分，秋季花盛開時采割，除去老莖，陰干。味苦性辛寒，歸肝、膽經，具有清虛熱、除骨蒸、解暑熱、截拒、退黃等作用。用于溫邪傷陰、夜熱早涼、陰虛發熱、骨蒸勞熱、暑邪發熱、瘧疾寒熱、濕熱黃疸。

臨床治療中抗炎藥物是僅次于抗感染藥物的第二大類藥物,其中包括甾體類抗炎藥物(SAID)與非甾體類抗炎藥物(NSAID)。但是由于許多合成藥物有較強的毒副反應，人們愈來愈重視從天然藥物中開發抗炎藥物。

發明內容

本發明旨在對青蒿抗炎活性新成分進行更深入的研究，發現其發揮抗炎作用的活性成分。

有鑒于此，本發明提出了一種生物堿類化合物或者其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、互變異構體、立體異構體、前藥分子、代謝物，所述化合物結構如式I所示：

本發明的另一目的在于提供一種上述化合物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟1：取青蒿干燥地上部分，用3-5倍水熱回流提取2-3次，每次2小時，合并提取液，減壓回收溶劑至原體積的1/10，加入90％-95％乙醇直至醇濃度達到70％-90％，靜置過夜，收集上清液減壓濃縮得總浸膏；

步驟2：所述總浸膏溶于水，經大孔吸附樹脂柱色譜分離，依次以水、45～55％乙醇、90～100％乙醇梯度洗脫，分別收集各洗脫液，減壓濃縮至無醇味，得到水洗脫部位、45％～55％乙醇洗脫部位、90～100％乙醇洗脫部位；

步驟3：取所述45～55％乙醇洗脫部位，經硅膠柱色譜分離，用二氯甲烷-甲醇梯度洗脫(100:0到0:100,v/v)，收集得到A-K共11個餾分，餾分D經ODS柱色譜分離，用甲醇-水(90:10到80:20,v/v)梯度洗脫，得到D1-D3共3個餾分，餾分D2經半制備液相色譜分離，即得。

進一步地，所述步驟1為：青蒿干燥地上部分，用3-5倍水熱回流提取2-3次，每次2小時，合并提取液，減壓回收溶劑至原體積的1/10，加入95％乙醇直至醇濃度達到80％，靜置過夜，收集上清液減壓濃縮得總浸膏。

優選地，所述步驟2的梯度洗脫為依次以水、45％乙醇、90％乙醇不同濃度的乙醇水溶液進行梯度洗脫。

具體地，所述大孔吸附樹脂選自D101型大孔吸附樹脂、HP-20型大孔吸附樹脂、HPD-100型大孔吸附樹脂、HPD-100A型大孔吸附樹脂或HPD-300型大孔吸附樹脂。

進一步地，所述半制備液相色譜的條件為：規格為C₁₈,5μm,10×250mm的Phenomenex Gemini柱，體積比例的甲醇-水為流動相，檢測波長為238-258nm，流速1-5mL/min；優選為246-250nm，流速3-4mL/min。

優選地，所述步驟1為用3倍水熱回流提取2次，每次2小時，合并提取液，減壓回收溶劑至原體積的1/10，加入95％乙醇直至醇濃度達到80％，靜置過夜，收集上清液減壓濃縮得總浸膏。

可選地，所述半制備液相色譜的條件優選為：體積比例15:85的甲醇-水為流動相，檢測波長為248nm，流速4mL/min，保留時間可為22.5min。