[發(fā)明專利]一種用于人體維生素B12含量檢測的釋放劑及其應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011156000.2
• 申請日: 2020-10-26
• 公開（公告）號: CN112485418B
• 公開（公告）日: 2023-04-11
• 發(fā)明（設計）人: 仝艷艷;王鵬
• 申請（專利權(quán)）人: 北京利德曼生化股份有限公司
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543;G01N21/76
• 代理公司: 天津翰林知識產(chǎn)權(quán)代理事務所(普通合伙) 12210
• 代理人: 付長杰

1.一種用于人體維生素B12含量檢測的釋放劑，其特征在于，用于定量檢測人血清或肝素血漿樣品中的維生素B12含量，所述釋放劑包括變性劑R1和中和劑R3；變性劑R1為Tris?-Hcl體系強堿溶液，中和劑R3為Tris-Hcl體系的無水乙醇、三(2-羧乙基)膦溶液；

所述中和劑R3的?pH值為6.0～6.6，包括：Tris-Hcl，濃度為90.0～90.8?g/L；無水乙醇，濃度為200.0-220.0?g/L；8-氨基-1-磺酸萘銨鹽，濃度為0.8-1.2g/L；三(2-羧乙基)膦，濃度為1.0-1.6g/L；EDTA，濃度為0.8-1.2g/L；

所述變性劑R1的pH值為12.0～13.0，包括：Tris-Hcl，濃度為7.5～8.2?g/L；氫氧化鈉，濃度為20.0-22.0?g/L。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于人體維生素B12含量檢測的釋放劑，其特征在于，所述變性劑R1的pH值為12.5，包括：Tris-Hcl，濃度為8.0?g/L；氫氧化鈉，濃度為21.0?g/L；其余為去離子水；變性劑R1的制備：稱取純化水700g，依次加入8g?Tris-Hcl、21g氫氧化鈉混合均勻，調(diào)整pH至12.5±0.05范圍內(nèi)，用純化水定重至1L。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于人體維生素B12含量檢測的釋放劑，其特征在于，所述中和劑R3?的pH值為6.3，包括：Tris-Hcl，濃度為90.4?g/L；無水乙醇，濃度為210.0?g/L；8-氨基-1-磺酸萘銨鹽，濃度為1.0?g/L；三(2-羧乙基)膦，濃度為1.3g/L；EDTA，濃度為1.0g/L；其余為去離子水；中和劑R3的制備：稱取純化水700g，依次加入90.4g?Tris-Hcl、210g無水乙醇、1g?8-氨基-1-磺酸萘銨鹽、1.3g三(2-羧乙基)膦、1g?EDTA混合均勻，調(diào)整pH至6.3±0.05范圍內(nèi)，用純化水定重至1L。

4.一種用于測定人體維生素B12含量的磁微粒化學發(fā)光檢測試劑，其特征在于，所述檢測試劑包括權(quán)利要求1-3任一所述的釋放劑，還包括維生素B12試劑R2、磁分離試劑、校準品、質(zhì)控品、化學發(fā)光底物液；

配制試劑R2：1）試劑R2的緩沖液采用商品化的AP?Conjugate?Stabilizer，pH為7.0；2）制備堿性磷酸酶標記的抗維生素B12抗體；3）將堿性磷酸酶標記的抗維生素B12抗體用試劑R2的緩沖液進行稀釋；

檢測試劑的靈敏度為：最低檢出量為?20.00pg/mL；重復性：靶值濃度范圍為200pg/mL±20%的質(zhì)控品QC1的精密度為5.24?%，靶值濃度范圍為1000pg/mL±20%的質(zhì)控品QC2精密度為4.62?%。