[發明專利]一種增加人甲狀腺過氧化物酶產量的試劑和表達方法

在審

• 申請號: 202011142206.X
• 申請日: 2020-10-22
• 公開（公告）號: CN112501141A
• 公開（公告）日: 2021-03-16
• 發明（設計）人: 易維京;馮奇;曹莎莎;李乾;付鵬德;張麗華;姬成東;趙忠顥
• 申請（專利權）人: 重慶中元匯吉生物技術有限公司
• 主分類號: C12N9/08
• 分類號: C12N9/08;C12N15/67;C12N15/866
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種增加人甲狀腺過氧化物酶表達產量的試劑，其特征在于，包括信號肽和分子伴侶。

2.如權利要求1所述的試劑，其特征在于，所述信號肽包括Pepidyl glycinealphaamidatingmonooxygenase(PAM，SEQ ID NO:1)、DBip(SEQ ID NO:2)、Melittin(SEQID NO:3)和GP64(SEQ ID NO:4)。

3.如權利要求1或2所述的試劑，其特征在于，所述分子伴侶為Bip(SEQ ID NO:8)、PDI(SEQ ID NO:9)、Calnexin(SEQ ID NO:10)或HSP70(SEQ ID NO:11)中的一種或幾種。

4.一種增加人甲狀腺過氧化物酶表達產量的方法，其特征在于，包括：

A、信號肽標記的TPO轉入病毒細胞，制作TPO病毒；

B、分子伴侶轉入病毒細胞，制作分子伴侶病毒；

C、將步驟A所述的TPO病毒和步驟B所述的分子伴侶病毒導入昆蟲細胞中進行表達，得TPO蛋白。

5.如權利要求4所述的方法，其特征在于，所述信號肽選自：PAM(SEQ ID NO:1)、DBip(SEQ ID NO:2)、Melittin(SEQ ID NO:3)或GP64(SEQ ID NO:4)。

6.如權利要求4或5所述的方法，其特征在于，所述分子伴侶為Bip(SEQ ID NO:8)、PDI(SEQ ID NO:9)、Calnexin(SEQ ID NO:10)或HSP70(SEQ ID NO:11)中的一種或幾種。

7.如權利要求4所述的方法，其特征在于，上述昆蟲細胞為H.five細胞。

8.如權利要求4所述的方法，其特征在于，還包括步驟D，所述步驟D包括將步驟C中表達得到的TPO蛋白進行純化。

9.如權利要求8所述的方法，其特征在于，所述純化為柱層析純化，所述柱層析純化的洗脫液在10℃以內低溫透析。

10.信號肽和分子伴侶在人甲狀腺過氧化物酶表達中的應用，所述信號肽包括PAM(SEQID NO:1)、DBip(SEQ ID NO:2)、Melittin(SEQ ID NO:3)或GP64(SEQ ID NO:4)；所述分子伴侶包括Bip(SEQ ID NO:8)、PDI(SEQ ID NO:9)、Calnexin(SEQ ID NO:10)或HSP70(SEQID NO:11)。