[發明專利]一種混菌發酵生產支鏈氨基酸的方法

有效

• 申請號: 202011134863.X
• 申請日: 2020-10-21
• 公開（公告）號: CN112195204B
• 公開（公告）日: 2022-04-15
• 發明（設計）人: 高鵬;陳釗;吳濤;褚凡;常利斌;龔華;李巖;趙津津
• 申請（專利權）人: 通遼梅花生物科技有限公司
• 主分類號: C12P13/06
• 分類號: C12P13/06;C12P13/08;C12N1/20;C12R1/15
• 代理公司: 內蒙古欣洋瑞專利代理有限公司 15110
• 代理人: 劉彩霞

1.一種混菌發酵生產支鏈氨基酸的方法，其特征在于，選擇異亮氨酸生產菌、亮氨酸生產菌或纈氨酸生產菌中的2株不同的生產菌株，分別為谷氨酸棒桿菌株SML001，保藏編號為CGMCC NO.13408和谷氨酸棒桿菌株SMV001，保藏編號為CGMCC NO.11938；采用混菌聯合發酵方法，制備得到亮氨酸、纈氨酸、異亮氨酸的質量比為2：0.8-1.2：0.8-1.2的發酵液；

所述混菌聯合發酵方法具體包括如下步驟：

(1)分別將所述谷氨酸棒桿菌株SML001和所述谷氨酸棒桿菌株SMV001用發酵罐進行培養，依次得到種子液1和種子液2；

(2)按照5-12％的接種比將種子液1接入發酵罐中，再按照12-20％的接種比將種子液2接入所述發酵罐中，進行聯合培養發酵，制備得到發酵液；聯合培養發酵過程中，發酵的前0-30h溫度控制在28-31℃；發酵的后30-50h溫度控制在31-34℃。

2.根據權利要求1所述的一種混菌發酵生產支鏈氨基酸的方法，其特征在于，所述步驟(2)聯合培養發酵過程中，發酵條件為：罐壓為0.04-0.1Mpa，通氣量為5-25L/min，攪拌速度為200-800rpm，pH為6.6-7.2；通過依次循環調節罐壓、通氣量、攪拌速度，將溶氧維持在15-35％。

3.根據權利要求1或2所述的一種混菌發酵生產支鏈氨基酸的方法，其特征在于，所述谷氨酸棒桿菌株SML001種子所用培養基組成包括：葡萄糖30g/L、酵母粉10g/L、硫酸銨5g/L、磷酸氫二鉀1g/L、硫酸鎂0.6g/L、消泡劑0.3mL/L、生物素0.2mg/L、VB1 2mg/L。

4.根據權利要求1或2所述的一種混菌發酵生產支鏈氨基酸的方法，其特征在于，所述谷氨酸棒桿菌株SMV001種子所用培養基組成包括：葡萄糖20g/L、玉米漿40g/L、硫酸銨10g/L、氯化鉀0.5g/L、硫酸鎂0.6g/L、消泡劑0.3mL/L、生物素0.4mg/L、VB1 2mg/L。

5.根據權利要求1或2所述的一種混菌發酵生產支鏈氨基酸的方法，其特征在于，所述步驟(2)聯合培養發酵過程中，發酵所用培養基組成包括：葡萄糖40g/L、玉米漿45g/L、硫酸銨15g/L、甜菜堿1.5g/L、氯化膽堿0.5g/L、磷酸氫二鉀1g/L、硫酸鎂2g/L、消泡劑0.3mL/L、生物素0.1mg/L、VB1 0.1mg/L。