[發(fā)明專利]西葫蘆ZYMV病毒病分子標(biāo)記與鑒定西葫蘆ZYMV病毒病抗性的方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011130718.4
• 申請(qǐng)日: 2020-10-21
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN114381539A
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-04-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張國(guó)裕;李海真;張帆;田佳星;賈長(zhǎng)才
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 北京市農(nóng)林科學(xué)院
• 主分類號(hào): C12Q1/6895
• 分類號(hào): C12Q1/6895;C12N15/11;A01H1/04
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 王灝增

本發(fā)明公開(kāi)了一種西葫蘆ZYMV病毒病分子標(biāo)記與鑒定西葫蘆ZYMV病毒病抗性的方法，所述ZYMV病毒病分子標(biāo)記多態(tài)性為西葫蘆基因組中是否缺失序列表中SEQ ID No.1中第172?196位所示的DNA片段。本發(fā)明獲得了與抗病基因緊密連鎖的分子標(biāo)記7547962。利用獲得的分子標(biāo)記進(jìn)行輔助選擇，成功的將抗病基因通過(guò)雜交、回交轉(zhuǎn)育的方法導(dǎo)入西葫蘆優(yōu)良自交系Teizer58中，使其獲得ZYMV病毒病抗性。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域中西葫蘆ZYMV病毒病分子標(biāo)記與鑒定西葫蘆ZYMV病毒病抗性性狀的引物對(duì)。

背景技術(shù)

西葫蘆(Cucurbita pepo L.)是我國(guó)重要的瓜類蔬菜，近年來(lái)栽培面積逐年擴(kuò)大，保護(hù)地栽培面積僅次于黃瓜，已成為農(nóng)民增收、農(nóng)業(yè)結(jié)構(gòu)調(diào)整的重要種植作物。

小西葫蘆黃化花葉病毒病(zucchini yellow mosaic virus，ZYMV)是目前危害西葫蘆等葫蘆科作物生產(chǎn)的主要病害之一。植株感染ZYMV后會(huì)產(chǎn)生花葉、植株矮化畸形，果實(shí)表面瘤狀凸凹不平、果肉僵硬且味苦澀等癥狀，使果實(shí)失去商品價(jià)值，導(dǎo)致產(chǎn)量損失可達(dá)60％以上，嚴(yán)重者甚至絕產(chǎn)。ZYMV病毒在世界范圍內(nèi)傳播蔓延迅速，在我國(guó)西葫蘆生產(chǎn)和制種中的危害也日趨嚴(yán)重和廣泛(劉勇等2019)。

目前還沒(méi)有防治ZYMV病毒病的有效試劑和措施，田間生產(chǎn)中主要依靠防治蚜蟲、及時(shí)拔除掩埋發(fā)病植株來(lái)降低病毒病的傳播與危害。培育和推廣抗病品種是減少病毒病危害最為經(jīng)濟(jì)、安全、有效的措施。但目前，由于通過(guò)人工接種進(jìn)行抗性鑒定存在操作繁瑣、性狀鑒定準(zhǔn)確性差、易于雜染其它病毒致使育種中途選擇失敗等問(wèn)題，導(dǎo)致抗性性狀轉(zhuǎn)育困難，抗病育種效率低、周期長(zhǎng)、易失敗等問(wèn)題，生產(chǎn)上抗病品種少。與抗病基因緊密連鎖的分子標(biāo)記可以提高選擇的準(zhǔn)確性、加速抗病育種進(jìn)程，在抗病育種中起到關(guān)鍵作用。因此，獲得與西葫蘆ZYMV抗病基因緊密連鎖的分子標(biāo)記，對(duì)提高西葫蘆抗病育種效率，培育抗病新品種，保障西葫蘆產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展具有重要的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是如何鑒定或者輔助鑒定西葫蘆的ZYMV病毒病抗性性狀。

為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明首先提供了西葫蘆ZYMV病毒病分子標(biāo)記。

本發(fā)明所提供的西葫蘆ZYMV病毒病分子標(biāo)記，為以西葫蘆的基因組DNA為模板，采用引物對(duì)A1進(jìn)行擴(kuò)增得到的DNA分子；所述A1由名稱為P1和P2的單鏈DNA組成，所述P1為與SEQ ID No.1的第172位上游特異結(jié)合的單鏈DNA，所述P2為與SEQ ID No.1 的第196位下游特異結(jié)合的單鏈DNA。

上述西葫蘆分子標(biāo)記的多態(tài)性可為西葫蘆基因組中對(duì)應(yīng)于SEQ ID No.1第172-196 位為SEQ ID No.1第172-196位或缺失SEQ ID No.1第172-196位。

上述西葫蘆分子標(biāo)記中，所述P1可為SEQ ID No.1的第1-21位所示的單鏈DNA，所述P2可為與SEQ ID No.1的第297-316位反向互補(bǔ)的單鏈DNA。

本發(fā)明還提供一種鑒定或輔助鑒定西葫蘆ZYMV病毒病抗性的方法，檢測(cè)西葫蘆的基因型鑒定或輔助鑒定西葫蘆的ZYMV病毒病抗性；所述基因型為西葫蘆基因組中 ZYMV病毒病分子標(biāo)記多態(tài)性的基因型，所述ZYMV病毒病分子標(biāo)記多態(tài)性為西葫蘆基因組中是否缺失序列表中SEQ ID No.1中第172-196位所示的DNA片段。