[發(fā)明專利]一株血桿菌及其在防治黃瓜枯萎病中的應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202011128099.5
• 申請(qǐng)日: 2020-10-20
• 公開（公告）號(hào): CN112251375B
• 公開（公告）日: 2022-04-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 周方園;劉梅;趙曉燕;吳曉青;周紅姿;張新建;張廣志;范素素;王加寧
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 山東省科學(xué)院生態(tài)研究所（山東省科學(xué)院中日友好生物技術(shù)研究中心）
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;A01N63/20;A01P3/00;A01G13/00;C12R1/01
• 代理公司: 濟(jì)南舜源專利事務(wù)所有限公司 37205
• 代理人: 于曉曉

1.一株血桿菌，其特征在于，所述血桿菌為血桿菌（Sanguibacter sp.）M0055，在中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心保藏，保藏編號(hào)為CGMCCNo.20597，保藏日期為2020年9月4日。

2.如權(quán)利要求1中所述血桿菌在防治黃瓜枯萎病中的應(yīng)用，其特征在于，所述黃瓜枯萎病是由尖孢鐮刀菌黃瓜專化型引起的。

3.一種用于防治黃瓜枯萎病的產(chǎn)品，其特征在于，活性成分為權(quán)利要求1所述血桿菌M0055的細(xì)胞懸浮液，有效活菌數(shù)為10⁸-10¹⁰CFU/mL。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的用于防治黃瓜枯萎病的產(chǎn)品，其特征在于，所述血桿菌M0055的細(xì)胞懸浮液制備方法為：

（1）將血桿菌大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)物接種于大豆酪蛋白培養(yǎng)基中28-32℃、180-200rpm培養(yǎng)12-16h得大豆酪蛋白培養(yǎng)基培養(yǎng)物；

（2）將大豆酪蛋白培養(yǎng)基培養(yǎng)物轉(zhuǎn)接到內(nèi)含大豆酪蛋白培養(yǎng)基的三角瓶中，28-32℃、180-200rpm培養(yǎng)68-75h得培養(yǎng)液；

（3）收集培養(yǎng)液5000-8000rpm離心10-15min，丟棄上清液；

（4）使用含有體積濃度0.05-0.08%吐溫-80的無菌磷酸鹽緩沖液重懸血桿菌M0055細(xì)胞，得到血桿菌M0055濃度為10⁸-10¹⁰CFU/mL的細(xì)胞懸浮液。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的用于防治黃瓜枯萎病的產(chǎn)品，其特征在于，所述血桿菌M0055的細(xì)胞懸浮液制備方法為：

（1）將血桿菌大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)物接種于大豆酪蛋白培養(yǎng)基中30℃、180rpm培養(yǎng)12h得大豆酪蛋白培養(yǎng)基培養(yǎng)物；

（2）將大豆酪蛋白培養(yǎng)基培養(yǎng)物轉(zhuǎn)接到內(nèi)含大豆酪蛋白培養(yǎng)基中的三角瓶中，30℃、180rpm培養(yǎng)72h得培養(yǎng)液；

（3）收集培養(yǎng)液6000rpm離心10min，丟棄上清液；

（4）使用含有體積濃度0.05%吐溫-80的無菌磷酸鹽緩沖液重懸血桿菌M0055細(xì)胞，得到血桿菌M0055的細(xì)胞懸浮液。

6.一種防治黃瓜枯萎病的方法，其特征在于，黃瓜幼苗使用如權(quán)利要求1所述血桿菌M0055細(xì)胞懸浮液進(jìn)行蘸根處理后栽培。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的防治黃瓜枯萎病的方法，其特征在于，將血桿菌細(xì)胞懸浮液稀釋至10⁷-10⁹CFU/mL，將待移植栽培的黃瓜幼苗根部浸泡于稀釋后的細(xì)胞懸浮液中浸泡10-30min，取出后瀝干至不再有懸浮液滴下為止，進(jìn)行栽培移植。